保留時間(retention time) 被分離樣品組分從進樣開始到柱后出現(xiàn)該組分濃度極大值時的時間,也既從進樣開始到出現(xiàn)某組分色譜峰的頂點時為止所經(jīng)歷的時間,稱為此組分的保留時間,用tR表示,常以分(min)為時間單位。保留時間是由色譜過程中的熱力學因素所決定,在一定的色譜操作條件下,任何一種物質(zhì)都有一確定的保留時間,可作為定性的依據(jù)。
半峰寬(peak width at half-height )又稱半寬度、半峰寬度、區(qū)域寬度、區(qū)域半寬度,是色譜峰高一半處的峰寬度,用y1/2(或W1/2)表示。半峰寬與標準偏差的關系為:
倍頻(overtune)基頻以外的其他振動能級躍遷產(chǎn)生的紅外吸收頻率統(tǒng)稱為倍頻。v=0至v=2的躍遷稱為第一個倍頻2n,相應地3n, 4n……等均稱為倍頻。
表面增強拉曼(Surface-Enhanced Raman Scattering) 簡稱SERS。用通常的拉曼光譜法測定吸附在膠質(zhì)金屬顆粒如銀、金或銅表面的樣品,或吸附在這些金屬片的粗糙表面上的樣品。盡管原因尚不明朗,人們發(fā)現(xiàn)被吸附的樣品其拉曼光譜的強度可提高103-106倍。主要用于吸附物種的狀態(tài)解析等。
薄膜法(thin film method) 適用于高分子化合物的紅外光譜測定。將樣品溶于揮發(fā)性溶劑后倒在潔凈的玻璃板上,在減壓干燥器中使溶劑揮發(fā)后形成薄膜,固定后進行測定。
差示分光光度法(differential spectrophotometry) 分光光度法中,樣品中被測組分濃度過大或濃度過小(吸光度過高或過低)時,測量誤差均較大。為克服這種缺點而改用濃度比樣品稍低或稍高的標準溶液代替試劑空白來調(diào)節(jié)儀器的100%透光率(對濃溶液)或0%透光率(對稀溶液)以提高分光光度法精密度、準確度和靈敏度的方法,稱為差示分光光度法。差示分光光度法又可分高吸光度差示法,低吸光度差示法,精密差示分光光度法等。
超臨界流體色譜(supercritical fluid chromatography SFC) 以超臨界流體作流動相,以固體吸附劑(如硅膠)或鍵合在載體(或毛細管壁)上的有機高分子聚合物作固定相的色譜方法。常用流動相為超臨界狀態(tài)下的CO2、氧化亞氮、乙烷、三氟甲烷等。CO2最常用,因為它的臨界溫度低(31℃)、臨界壓力適中(7.29MP)、無毒、便宜,但其缺點是極性太低,對一些極性化合物的溶解能力較差,所以,通常要用另一臺輸液泵往流動相中添加1~5%的甲醇等極性有機改性劑。SFC所用色譜柱既有液相色譜的填充柱,又有氣相色譜的毛細管柱,但由于超臨界流體的強溶解能力,所使用的毛細管填充柱的固定相必須進行交聯(lián)。從理論上講,SFC既可以象液相色譜一樣分析高沸點和難揮發(fā)樣品,也可象氣相色譜一樣分析揮發(fā)性成分。不過,超臨界流體色譜更重要的應用是用來作分離和制備,即超臨界流體萃取。
程序升溫氣相色譜法(programmed temperature [gas] chromatography) 在氣相色譜分析中,色譜柱溫度對分離效能有重要影響,當樣品中所含組分沸程較寬時,應采用程序升溫色譜法。所謂程序升溫色譜法,是指色譜柱的溫度按照組分沸程設置的程序連續(xù)地隨時間線性或非線性逐漸升高,使柱溫與組分的沸點相互對應,以使低沸點組分和高沸點組分在色譜柱中都有適宜的保留、色譜峰分布均勻且峰形對稱。各組分的保留值可以色譜峰最高處的相應溫度即保留溫度表示。
串聯(lián)質(zhì)譜法(Tandem mass spectrometry MS/MS)又稱為質(zhì)譜-質(zhì)譜法/Mass spectrometry/ Mass spectrometry (MS/MS)利用串聯(lián)質(zhì)譜儀進行化合物分析的方法。第一級質(zhì)譜的離子源里生成離子群,從中選擇其中的一種作為母離子,在第二級質(zhì)譜中,對母離子裂解生成的子離子進行檢測。為了使母離子裂解,在第一級質(zhì)譜和第二級質(zhì)譜之間設置碰撞室,發(fā)生碰撞誘導解離(CID)。
大氣壓化學電離(APCI)是一種質(zhì)譜離子化方式。它是在大氣壓狀態(tài)下進行的化學電離。在氣體輔助下,溶劑和樣品流過進樣毛細管,在毛細管內(nèi)樣品和溶劑被加熱氣化,在毛細管出口通過噴霧形成樣品氣溶膠,在毛細管的下游有一個放電針,利用電暈放電使氣體和溶劑電離,生成反應離子,反應離子再與樣品進行反應實現(xiàn)樣品離子化。
導數(shù)分光光度法(derivative spectrophotometry) 利用導數(shù)吸收光譜進行測定的一種光度分析技術。用吸光度對波長求一階或高階導數(shù)并對波長l作圖,可以得到導數(shù)光譜。導數(shù)光譜對吸收強度隨波長的變化很敏感,對重疊吸收帶有較好的分辨能力;能選擇性地放大窄而弱的吸收帶,從而能從一個強干擾背景中檢測出較弱的信號;提高狹窄譜帶吸收強度從而提高分析靈敏度。所以,導數(shù)分光光度法在多組份同時測定、混濁樣品分析、消除背景干擾、加強光譜精細結構和復雜光譜的解析等方面有其獨特的優(yōu)點。目前,市售的分光光度計己能方便地獲得1-4階甚至更高階的導數(shù)光譜。
單色器(monochrometer) 將光源發(fā)出的光分離成所需要的單色光的器件稱為單色器。單色器由入射狹縫、準直鏡、色散元件、物鏡和出射狹縫構成。其中色散元件是關鍵部件,作用是將復合光分解成單色光。入射狹縫用于限制雜散光進入單色器,準直鏡將入射光束變?yōu)槠叫泄馐筮M入色散元件。物鏡將出自色散元件的平行光聚焦于出口狹縫。出射狹縫用于限制通帶寬度 。
單聚焦質(zhì)譜儀(single focusing mass spectrometer) 通常指質(zhì)量分析器只有一個扇形磁場的質(zhì)譜儀,僅對離子進行方向聚焦,帶電粒子加速進入磁場后,在洛侖茲力的作用下,運動方向發(fā)生偏轉,其運動軌跡的曲率半徑大小與質(zhì)荷比有關。根據(jù)這個原理,不同質(zhì)荷比的離子經(jīng)過磁場因運動曲率半徑不同,即可分開,具有相同質(zhì)荷比和相同初速度的離子,即使以不同的角度進入磁場,經(jīng)磁場偏轉,可以聚焦在一點。也就是說,磁場分析器,對質(zhì)量有色散作用,對方向有聚焦作用 。這是一種低分辨的儀器。
電離電位
當原子獲得足夠大的能量而其一個或某些外層電子脫離該原子核的作用力范圍,成為自由電子,這時原子由于失去電子而成為離子,這種現(xiàn)象稱為電離。為使原子發(fā)生電離所需的能量稱為電離能,也稱電離電位,以電子伏特為單位。原子失去一個電子,稱為一次電離;失去二個電子稱為二次電離,依次類推。產(chǎn)生不同程度電離的電離電位是不同的。
電弧光源
電弧放電是在大氣壓下兩電極間的一種氣體放電現(xiàn)象;」夥烹娝哂械哪芰,可使試樣蒸發(fā)、原子化和激發(fā),從而發(fā)射輻射。發(fā)射光譜分析用的弧光光源有直流弧光和交流弧光兩種,并有高壓弧光和低壓弧光之分。高壓直流電弧和高壓交流電弧,可以自動引燃,但操作很不安全,現(xiàn)已很少使用。低壓直流電弧和低壓交流電弧光源,操作比較安全,但需附加引燃裝置。引燃的方式有高頻引燃和電子引燃兩種,后者具有更高的穩(wěn)定性。
電感耦合高頻等離子體光源(ICP)電感耦合高頻等離子光源是本世紀60年代出現(xiàn)的一種新型的光譜激發(fā)光源。等離子體是一種由自由離子、電子、中性原子與分子所組成的在總體上呈中性的氣體。在近代物理學中,把電離度大于0.1%,其正負電荷相等的電離氣體稱為等離子體。ICP裝置由高頻發(fā)生器和感應器、炬管和供氣系統(tǒng)、試樣引入系統(tǒng)三部分組成。高頻發(fā)生器的作用是產(chǎn)生高頻磁場以供給等離子體能量。感應圈一般為以圓銅管或方銅管繞成的2-5匝水冷線圈。等離子炬管由三層同心石英管組成。ICP焰明顯地分為三個區(qū)域:焰心區(qū)、內(nèi)焰區(qū)和尾焰區(qū)。內(nèi)焰區(qū)溫度約6000-8000K,是分析物原子化、激發(fā)、電離與輻射的主要區(qū)域。
電荷轉移吸收光譜
當外來輻射照射某些有機或無機化合物時,可能發(fā)生一個電子從該化合物具有電子給予體特性部分(稱為給體,donor)轉移到該化合物的另一具有電子接受體特性的部分(稱為受體,acceptor),這種電子轉移產(chǎn)生的吸收光譜,稱為電荷轉移吸收光譜。電荷轉移吸收光譜涉及的是給體的一個電子向受體的一個電子軌道上的躍遷,激發(fā)態(tài)是這一內(nèi)氧化還原過程的產(chǎn)物。如金屬配合物吸收光能時,躍遷包括電子從配體中的π能級或者σ能級激發(fā)到金屬離子的空軌道,或者金屬離子的電子激發(fā)到配體的空π軌道。電荷轉移躍遷是極其強烈的,摩爾吸光系數(shù)ε一般在104-105,光譜在紫外或可見區(qū)。電荷轉移的容易程度隨配體共軛程度增大而增大。電荷轉移吸收光譜很適于痕量金屬離子的高靈敏度測定。
電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(Inductively Coupled Plasma mass spectrometer)(ICP-MS) 是一種多元素微量分析和同位素分析儀器。用電感耦合等離子體(ICP)作為離子源,元素在ICP中離子化,所產(chǎn)生的離子被引入質(zhì)譜計進行分析。這種儀器靈敏度很高,是目前進行無機元素分析的最有力工具之一。
電噴霧電離(electrospray ionization ESI) 使用電噴霧技術實現(xiàn)離子化的方法。在輸送樣品溶液的毛細管出口端與對應電極之間施加數(shù)千伏的高電壓,在毛細管出口可形成圓錐狀的液體錐(Taylor cone)。由于強電場的作用,引發(fā)正、負離子的分離,從而生成帶高電荷的液滴。在加熱氣體(干燥氣體)的作用下,液滴中的溶劑被汽化,隨著液滴體積逐漸縮小,液滴的電荷密度超過表面張力極限(雷利極限),引起液滴自發(fā)的分裂,亦可稱為"庫侖爆炸"。分裂的帶電液滴隨著溶劑的進一步變小,最終導致離子從帶電液滴中蒸發(fā)出來,產(chǎn)生單電荷或多電荷離子。質(zhì)子的加成可生成單價或多價正離子,而脫質(zhì)子可生成單價或多價負離子。
電子電離源(electron ionization source) (EI) 又稱電子轟擊離子源(electron bombardment ionization source是質(zhì)譜儀離子源中最常用的一種。簡稱EI源。主要由陰極(燈絲)、離子室、電子接收極、一組靜電透鏡組成。在高真空條件下,給燈絲加電流,使燈絲發(fā)射電子,電子從燈絲加速飛向電子接收極,在此過程中與離子室中的樣品分子發(fā)生碰撞,使樣品分子離子化或碎裂成碎片離子。為了使產(chǎn)生的離子流穩(wěn)定,電子束的能量一般設為70電子伏特,這樣可以得到穩(wěn)定的標準質(zhì)譜圖。利用電子電離源可以得到樣品的分子量信息和結構信息。但不適于分析易分解、難揮發(fā)的化合物。
頂空氣相色譜法(headspace gas chromatography GC-HS) 也稱液上氣相色譜分析,是一種對液體或固體樣品中所含揮發(fā)性成分進行氣相色譜分析的間接測定方法。將被分析樣品放在一個密閉容器中(通常為可密封的小玻璃瓶),在一恒定的溫度下達到熱力學平衡,以樣品容器上部空間的蒸汽作為樣品進行色譜分析。當樣品瓶中當液上的蒸汽壓相當?shù)蜁r,色譜峰面積Ai的大小與樣品中揮發(fā)性組分的蒸汽壓PI成正比,Ai=CiPI,式中ci是校正因子。在真實體系中,蒸汽分壓可表示為Pi=P0iχiγi,P0i為組分i的飽和蒸汽壓,χi是組分i的摩爾分數(shù),γi是組分i的活度系數(shù)。
多普勒變寬
多普勒寬度是由于原子熱運動引起的。從物理學中已知,從一個運動著的原子發(fā)出的光,如果運動方向離開觀測者,則在觀測者看來,其頻率較靜止原子所發(fā)的光的頻率低;反之,如原子向著觀測者運動,則其頻率較靜止原子發(fā)出的光的頻率為高,這就是多普勒效應。原子吸收分析中,對于火焰和石墨爐原子吸收池,氣態(tài)原子處于無序熱運動中,相對于檢測器而言,各發(fā)光原子有著不同的運動分量,即使每個原子發(fā)出的光是頻率相同的單色光,但檢測器所接受的光則是頻率略有不同的光,于是引起譜線的變寬。
端吸收(end absorption) 指由分子內(nèi)n?s*躍遷引起的對紫外區(qū)短波長端至遠紫外區(qū)的強吸收。
發(fā)光量子產(chǎn)率(luminescence quantum yield) 定義為發(fā)光物質(zhì)吸光后所發(fā)射光的光子數(shù)與所吸收的激發(fā)光的光子數(shù)之比值。在通常情況下,發(fā)光量子產(chǎn)率的數(shù)值總是小于1。發(fā)光量子產(chǎn)率的數(shù)值越大,化合物的熒光或磷光越強。不發(fā)光的物質(zhì),其發(fā)光量子產(chǎn)率的數(shù)值為零或非常接近于零。重原子的引入使熒光量子產(chǎn)率減小,磷光量子產(chǎn)率增加。
反射吸收法(reflection absorption spectroscopy)又稱RAS法。用于樣品表面、金屬板上涂層薄膜的紅外光譜測定。甚至用于單分子層的解析。入射光經(jīng)反射鏡照射到樣品表面,其反射光再經(jīng)另一反射鏡進入儀器。反射吸收測定的原理是,只有與基板垂直的偶極矩變化可以被選擇性地檢測。詳見5.3.4。
反相高效液相色譜法(reversed phase high performance liquid chromatography RP-HPLC) 由非極性固定相和極性流動相所組成的液相色譜體系。它正好與由極性固定相和弱極性流動相所組成的液相色譜體系(正相色譜)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基鍵合硅膠,典型的流動相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是當今液相色譜的最主要的分離模式,幾乎可用于所有能溶于極性或弱極性溶劑中的有機物的分離。
反相離子對色譜(reversed phase ion pair chromatography) 指用適當?shù)姆措x子與被測離子形成具有一定疏水性的離子對化合物后,采用反相高效液相色譜體系分離所形成的離子對化合物的方法。
飛行時間分析器(Time of Flight analyzer) 是一種結構最簡單的質(zhì)譜儀分析器。主要由一個長度L的無場真空管(漂移管)構成。質(zhì)荷比為m/z的離子從離子源被加速(加速電壓為V)引出后,進入無場空間,經(jīng)過一定時間t秒后到達漂移管另一端,不同質(zhì)荷比的離子因速度不同,到達固定飛行時間距離所需的時間不同,其運動方程可寫為: 當V、L不變的條件下,飛行時間t與質(zhì)荷比的平方根成正比。測定飛行時間t即可確定m/z的值。這種依據(jù)飛行時間來測定質(zhì)量的分析器叫飛行時間分析器。
飛行時間質(zhì)譜儀(Time of Flight Mass Spectrometer) (TOF) 是一種很常用的質(zhì)譜儀。這種質(zhì)譜儀的質(zhì)量分析器是一個離子漂移管。由離子源產(chǎn)生的離子加速后進入無場漂移管,并以恒定速度飛向離子接收器。離子質(zhì)量越大,到達接收器所用時間越長,離子質(zhì)量越小,到達接收器所用時間越短,根據(jù)這一原理,可以把不同質(zhì)量的離子按m/z值大小進行分離。飛行時間質(zhì)譜儀可檢測的分子量范圍大,掃描速度快,儀器結構簡單。這種飛行時間質(zhì)譜儀的主要缺點是分辨率低,因為離子在離開在離子源時初始能量不同,使得具有相同質(zhì)荷比的離子達到檢測器的時間有一定分布,造成分辨能力下降。改進的方法之一是在線性檢測器前面的加上一組靜電場反射鏡,將自由飛行中的離子反推回去,初始能量大的離子由于初始速度快,進入靜電場反射鏡的距離長,返回時的路程也就長,初始能量小的離子返回時的路程短,這樣就會在返回路程的一定位置聚焦,從而改善了儀器的分辨能力。這種帶有靜電場反射鏡的飛行時間質(zhì)譜儀被稱為反射式飛行時間質(zhì)譜儀/Reflectron time-of-flight mass spectrometer。
分光光度法(spectrophotometry) 又稱吸收光度法(absorption spectrophotometry )。是利用物質(zhì)本身對光的吸收特性或借助加入顯色劑使被測物質(zhì)顯色,根據(jù)其對不同波長單色光的吸收程度而對物質(zhì)進行定量分析的一類分析方法?捎糜谖镔|(zhì)的定性鑒定;由某物質(zhì)在一定波長處測得的吸光度與其濃度作圖得到的工作曲線可用于該物質(zhì)的定量分析。由于分光光度法靈敏較高,選擇性較好,設備簡單,在各行各業(yè)中都得到廣泛應用。
分光光度滴定(photometric titration) 將滴定操作與吸光度測量相結合的一種分析方法。將一定量的標準溶液滴定到待測溶液中,同時測定待測溶液體系在適當波長處的吸光度,通過吸光度對滴定劑用量作圖(稱光度滴定曲線)來確定反應終點的方法。它不僅能應用于配位、酸堿、氧化還原反應,有時還能用于沉淀反應。其特點是終點的確定較指示劑法更為靈敏和準確,還可以用于有色溶液的滴定。
分析器(analyzer) 質(zhì)譜儀的一個主要部件,又叫質(zhì)量分析器。它的作用是將離子源產(chǎn)生的離子按荷質(zhì)比(m/z)的差別,按空間的位置或時間的先后進行分離,以便得到按質(zhì)荷比(m/z)大小順序排列的質(zhì)譜圖。常用分析器有:磁分析器,磁場和電場組合的雙聚焦分析器,四極分析器,飛行時間分析器,離子回旋共振分析器,離子阱質(zhì)量分析器等。
粉末反射法(diffusive reflection method) 又稱擴散反射法或DF法。壓片法適用或不適用的樣品都可以用粉末反射法測定其紅外光譜,也用于微小樣品、色譜餾分的紅外光譜定性、吸著在粉末表面樣品的紅外光譜分析。該法的原理是,照射到粉末樣品上的光首先在其表面反射,一部分直接進入檢測器,另一部分進入樣品內(nèi)部多次透過、散射后再從表面射出,后者稱為擴散反射光。粉末反射法就是利用擴散散射光獲取紅外光譜的方法。與壓片法相比,該法由于測定的是多次經(jīng)過樣品的光,因此兩者的光譜強度比不同,壓片法中的弱峰有時會增強。詳見5.3.4。
傅立葉變換紅外光譜儀(Fourier transform infrared spectrometer FT-IR)光源發(fā)出的光進入Michelson干涉儀,然后經(jīng)樣品吸收后,測定光強隨動鏡移動距離的變化,再經(jīng)傅立葉變換得到物質(zhì)的紅外光譜的儀器。具有高靈敏度、高分辨率等優(yōu)點。
傅立葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀(Fourier-transform ion cyclotron resonance mass spectrometer)(FT-ICR-MS)是一種高性能的高分辨質(zhì)譜儀。亦可直接用FT-MS表示(Fourier-transform mass spectrometry)。它的核心部件是帶傅立葉變換程序的計算機和捕獲離子的分析室。分析室是一個置于強磁場中的立方體結構。離子被引入分析室后,在強磁場作用下被迫以很小的軌道半徑作圓周運動,離子的回旋頻率與離子質(zhì)量成反比,此時不產(chǎn)生可檢出信號。如果在立方體的一對面上(發(fā)射極)加一快速掃頻電壓,一對極板施加一個射頻電壓,當其頻率與離子回旋頻率相等時則發(fā)生滿足共振條件時,離子吸收射頻能量,運動軌道半徑增大,撞到檢測器產(chǎn)生可檢出信號。這種信號是一種正弦波,振幅與共振離子數(shù)目成正比。實際使用中測得的信號是在同一時間內(nèi)所對應的正弦波信號的疊加。這種信號輸入計算機進行快速傅立葉變換,利用頻率和質(zhì)量的已知關系可得到質(zhì)譜圖。傅立葉變換質(zhì)譜儀具有很高的分辨率(可達100萬以上)和很高的靈敏度,但儀器價格和維持費用也很高。
高效液相色譜法(high performance liquid chromatography HPLC)又稱高壓液相色譜法或高速液相色譜法是指具有操作簡便、分離速度快、分離效率高和檢測靈敏度高等優(yōu)良性能的液相色譜體系。液相色譜法早在1903年就由俄國植物學家Tswett發(fā)明,但早期的液相色譜法(古典液相色譜)柱效低、分離時間長,難以解決復雜樣品的分離。到了20世紀60年代中后期,粒度小而均勻、傳質(zhì)速率快的色譜填料相繼出現(xiàn),使柱效顯著提高,高壓輸液泵的使用解決了流動相流速慢的問題。從此液相色譜有了飛躍的發(fā)展,為區(qū)別于古典液相色譜法而稱高效液相色譜法。HPLC幾乎可以分離和分析任何物質(zhì),是最有效和應用最廣泛的分離分析技術。
共振拉曼(Resonance Raman Scattering)簡稱RRS 以分析物的紫外-可見吸收光譜峰的鄰近波長作為激發(fā)波長,樣品分子吸光后躍遷至高電子能級并立即回到基態(tài)的某一振動能級,產(chǎn)生共振拉曼散射。與熒光(10-6-10-8秒)相比,該過程很短(10-14秒) 。共振拉曼強度比普通的拉曼光譜法強度可提高102-106倍,檢測限可達10-8摩爾/升,因此用于高靈敏度測定以及狀態(tài)解析等,主要不足是熒光干擾。
光二極管陣列檢測
是利用光二極管陣列檢測器對光子進行檢測。光二極管陣列檢測器是一種對光子有響應的檢測器。它是由硅片上形成的反相偏置的p-n結組成。反向偏置造成了一個耗盡層,使該結的傳導性幾乎降到了零。當輻射照到n區(qū),就可形成空穴和電子?昭ㄍㄟ^耗盡層到達p區(qū)而湮滅,于是電導增加,增加的大小與輻射功率成正比。光二極管陣列檢測器每平方毫米含有15000個以上的光二極管。每個二極管都與其鄰近的二極管絕緣,它們都聯(lián)結到一個共同的n型層上。當光二極管陣列表面被電子束掃描時,每個p型柱就連接著被充電到電子束的電位,起一個充電電容器的作用。當光子打到n型表面以后形成空穴,空穴向p區(qū)移動并使沿入射輻射光路上的幾個電容器放電。然后當電子束再次掃到它們時,又使這些電容器充電。這一充電電流隨后被放大作為信號。光二極管陣列可以制成光學多道分析器。
光致發(fā)光(photoluminescence) 分子或離子等吸收紫外或可見光后,再以紫外或可見光的形式發(fā)射能量,這種現(xiàn)象稱為光致發(fā)光。一般光致發(fā)光指熒光及磷光現(xiàn)象。發(fā)光量子產(chǎn)率與激發(fā)光波長(或能量)有關,發(fā)光強度隨激發(fā)波長的變化稱為激發(fā)光譜。激發(fā)光譜與發(fā)射光譜間符合斯托克斯規(guī)則。光致發(fā)光可用于研究物質(zhì)的電子狀態(tài),發(fā)光物質(zhì)的痕量分析,發(fā)光體的分子取向,發(fā)光過程的動力學研究等等。采用發(fā)光探針,可以大大擴展光致發(fā)光的應用范圍,在生物醫(yī)學、環(huán)境科學等領域有廣闊的應用前景。
光聲效應(phtoacoustic effect) 由電話發(fā)明家A.G.Bell于1880年提出。經(jīng)調(diào)制的斷續(xù)光照射于物質(zhì)時,物質(zhì)發(fā)射與斷續(xù)光頻率相等的聲波,這種現(xiàn)象稱為光聲效應。
光散射檢測器(light scattering detector) 利用物質(zhì)微粒(包括分子)對光的散射作用進行分析的檢測器。當某一波長的光照射在物質(zhì)微粒上時,除一部分通過物質(zhì)微粒或被微粒吸收外,大部分的光將以同樣的波長向各個方向散射(瑞利散射),散射光的強度是微粒數(shù)量和微粒大小的函數(shù)。光散射檢測器是凝膠色譜中常用的檢測器之一。
固定相(stationary phase) 柱色譜或平板色譜中既起分離作用又不移動的那一相。固定相的的選擇對樣品的分離起著重要作用,有時甚至是決定性的作用。不同類型的色譜采用不同的固定相,如氣-固色譜的固定相為各種具有吸附活性的固體吸附劑;氣-液色譜的固定相是載體表面涂漬的固定液,液相色譜中的固定相為各種鍵合型的硅膠小球,離子交換色譜中的固定相為各種離子交換劑,排阻色譜中的固定相為各種不同類型的凝膠等等。
紅移(bathochromic shift) 或 red shift 指由于使用不同的溶劑或引入取代基所引起的化合物的光譜(紫外-可見吸收或熒光等)的吸收峰向長波長方向移動的現(xiàn)象,其機理可由躍遷能級的變化來闡明。例如,當化合物溶于極性溶劑時,會產(chǎn)生溶劑化作用,由于激發(fā)態(tài)和基態(tài)的電荷分布不同而使這兩種狀態(tài)的溶劑化程度不同。溶劑的極性愈大,有機分子的成鍵π軌道向反鍵π* 軌道的躍遷能愈小,即激發(fā)態(tài)的極性大于基態(tài),激發(fā)態(tài)能級降低比基態(tài)大,從而光譜發(fā)生紅移。
半峰寬(peak width at half-height )又稱半寬度、半峰寬度、區(qū)域寬度、區(qū)域半寬度,是色譜峰高一半處的峰寬度,用y1/2(或W1/2)表示。半峰寬與標準偏差的關系為:
倍頻(overtune)基頻以外的其他振動能級躍遷產(chǎn)生的紅外吸收頻率統(tǒng)稱為倍頻。v=0至v=2的躍遷稱為第一個倍頻2n,相應地3n, 4n……等均稱為倍頻。
表面增強拉曼(Surface-Enhanced Raman Scattering) 簡稱SERS。用通常的拉曼光譜法測定吸附在膠質(zhì)金屬顆粒如銀、金或銅表面的樣品,或吸附在這些金屬片的粗糙表面上的樣品。盡管原因尚不明朗,人們發(fā)現(xiàn)被吸附的樣品其拉曼光譜的強度可提高103-106倍。主要用于吸附物種的狀態(tài)解析等。
薄膜法(thin film method) 適用于高分子化合物的紅外光譜測定。將樣品溶于揮發(fā)性溶劑后倒在潔凈的玻璃板上,在減壓干燥器中使溶劑揮發(fā)后形成薄膜,固定后進行測定。
差示分光光度法(differential spectrophotometry) 分光光度法中,樣品中被測組分濃度過大或濃度過小(吸光度過高或過低)時,測量誤差均較大。為克服這種缺點而改用濃度比樣品稍低或稍高的標準溶液代替試劑空白來調(diào)節(jié)儀器的100%透光率(對濃溶液)或0%透光率(對稀溶液)以提高分光光度法精密度、準確度和靈敏度的方法,稱為差示分光光度法。差示分光光度法又可分高吸光度差示法,低吸光度差示法,精密差示分光光度法等。
超臨界流體色譜(supercritical fluid chromatography SFC) 以超臨界流體作流動相,以固體吸附劑(如硅膠)或鍵合在載體(或毛細管壁)上的有機高分子聚合物作固定相的色譜方法。常用流動相為超臨界狀態(tài)下的CO2、氧化亞氮、乙烷、三氟甲烷等。CO2最常用,因為它的臨界溫度低(31℃)、臨界壓力適中(7.29MP)、無毒、便宜,但其缺點是極性太低,對一些極性化合物的溶解能力較差,所以,通常要用另一臺輸液泵往流動相中添加1~5%的甲醇等極性有機改性劑。SFC所用色譜柱既有液相色譜的填充柱,又有氣相色譜的毛細管柱,但由于超臨界流體的強溶解能力,所使用的毛細管填充柱的固定相必須進行交聯(lián)。從理論上講,SFC既可以象液相色譜一樣分析高沸點和難揮發(fā)樣品,也可象氣相色譜一樣分析揮發(fā)性成分。不過,超臨界流體色譜更重要的應用是用來作分離和制備,即超臨界流體萃取。
程序升溫氣相色譜法(programmed temperature [gas] chromatography) 在氣相色譜分析中,色譜柱溫度對分離效能有重要影響,當樣品中所含組分沸程較寬時,應采用程序升溫色譜法。所謂程序升溫色譜法,是指色譜柱的溫度按照組分沸程設置的程序連續(xù)地隨時間線性或非線性逐漸升高,使柱溫與組分的沸點相互對應,以使低沸點組分和高沸點組分在色譜柱中都有適宜的保留、色譜峰分布均勻且峰形對稱。各組分的保留值可以色譜峰最高處的相應溫度即保留溫度表示。
串聯(lián)質(zhì)譜法(Tandem mass spectrometry MS/MS)又稱為質(zhì)譜-質(zhì)譜法/Mass spectrometry/ Mass spectrometry (MS/MS)利用串聯(lián)質(zhì)譜儀進行化合物分析的方法。第一級質(zhì)譜的離子源里生成離子群,從中選擇其中的一種作為母離子,在第二級質(zhì)譜中,對母離子裂解生成的子離子進行檢測。為了使母離子裂解,在第一級質(zhì)譜和第二級質(zhì)譜之間設置碰撞室,發(fā)生碰撞誘導解離(CID)。
大氣壓化學電離(APCI)是一種質(zhì)譜離子化方式。它是在大氣壓狀態(tài)下進行的化學電離。在氣體輔助下,溶劑和樣品流過進樣毛細管,在毛細管內(nèi)樣品和溶劑被加熱氣化,在毛細管出口通過噴霧形成樣品氣溶膠,在毛細管的下游有一個放電針,利用電暈放電使氣體和溶劑電離,生成反應離子,反應離子再與樣品進行反應實現(xiàn)樣品離子化。
導數(shù)分光光度法(derivative spectrophotometry) 利用導數(shù)吸收光譜進行測定的一種光度分析技術。用吸光度對波長求一階或高階導數(shù)并對波長l作圖,可以得到導數(shù)光譜。導數(shù)光譜對吸收強度隨波長的變化很敏感,對重疊吸收帶有較好的分辨能力;能選擇性地放大窄而弱的吸收帶,從而能從一個強干擾背景中檢測出較弱的信號;提高狹窄譜帶吸收強度從而提高分析靈敏度。所以,導數(shù)分光光度法在多組份同時測定、混濁樣品分析、消除背景干擾、加強光譜精細結構和復雜光譜的解析等方面有其獨特的優(yōu)點。目前,市售的分光光度計己能方便地獲得1-4階甚至更高階的導數(shù)光譜。
單色器(monochrometer) 將光源發(fā)出的光分離成所需要的單色光的器件稱為單色器。單色器由入射狹縫、準直鏡、色散元件、物鏡和出射狹縫構成。其中色散元件是關鍵部件,作用是將復合光分解成單色光。入射狹縫用于限制雜散光進入單色器,準直鏡將入射光束變?yōu)槠叫泄馐筮M入色散元件。物鏡將出自色散元件的平行光聚焦于出口狹縫。出射狹縫用于限制通帶寬度 。
單聚焦質(zhì)譜儀(single focusing mass spectrometer) 通常指質(zhì)量分析器只有一個扇形磁場的質(zhì)譜儀,僅對離子進行方向聚焦,帶電粒子加速進入磁場后,在洛侖茲力的作用下,運動方向發(fā)生偏轉,其運動軌跡的曲率半徑大小與質(zhì)荷比有關。根據(jù)這個原理,不同質(zhì)荷比的離子經(jīng)過磁場因運動曲率半徑不同,即可分開,具有相同質(zhì)荷比和相同初速度的離子,即使以不同的角度進入磁場,經(jīng)磁場偏轉,可以聚焦在一點。也就是說,磁場分析器,對質(zhì)量有色散作用,對方向有聚焦作用 。這是一種低分辨的儀器。
電離電位
當原子獲得足夠大的能量而其一個或某些外層電子脫離該原子核的作用力范圍,成為自由電子,這時原子由于失去電子而成為離子,這種現(xiàn)象稱為電離。為使原子發(fā)生電離所需的能量稱為電離能,也稱電離電位,以電子伏特為單位。原子失去一個電子,稱為一次電離;失去二個電子稱為二次電離,依次類推。產(chǎn)生不同程度電離的電離電位是不同的。
電弧光源
電弧放電是在大氣壓下兩電極間的一種氣體放電現(xiàn)象;」夥烹娝哂械哪芰,可使試樣蒸發(fā)、原子化和激發(fā),從而發(fā)射輻射。發(fā)射光譜分析用的弧光光源有直流弧光和交流弧光兩種,并有高壓弧光和低壓弧光之分。高壓直流電弧和高壓交流電弧,可以自動引燃,但操作很不安全,現(xiàn)已很少使用。低壓直流電弧和低壓交流電弧光源,操作比較安全,但需附加引燃裝置。引燃的方式有高頻引燃和電子引燃兩種,后者具有更高的穩(wěn)定性。
電感耦合高頻等離子體光源(ICP)電感耦合高頻等離子光源是本世紀60年代出現(xiàn)的一種新型的光譜激發(fā)光源。等離子體是一種由自由離子、電子、中性原子與分子所組成的在總體上呈中性的氣體。在近代物理學中,把電離度大于0.1%,其正負電荷相等的電離氣體稱為等離子體。ICP裝置由高頻發(fā)生器和感應器、炬管和供氣系統(tǒng)、試樣引入系統(tǒng)三部分組成。高頻發(fā)生器的作用是產(chǎn)生高頻磁場以供給等離子體能量。感應圈一般為以圓銅管或方銅管繞成的2-5匝水冷線圈。等離子炬管由三層同心石英管組成。ICP焰明顯地分為三個區(qū)域:焰心區(qū)、內(nèi)焰區(qū)和尾焰區(qū)。內(nèi)焰區(qū)溫度約6000-8000K,是分析物原子化、激發(fā)、電離與輻射的主要區(qū)域。
電荷轉移吸收光譜
當外來輻射照射某些有機或無機化合物時,可能發(fā)生一個電子從該化合物具有電子給予體特性部分(稱為給體,donor)轉移到該化合物的另一具有電子接受體特性的部分(稱為受體,acceptor),這種電子轉移產(chǎn)生的吸收光譜,稱為電荷轉移吸收光譜。電荷轉移吸收光譜涉及的是給體的一個電子向受體的一個電子軌道上的躍遷,激發(fā)態(tài)是這一內(nèi)氧化還原過程的產(chǎn)物。如金屬配合物吸收光能時,躍遷包括電子從配體中的π能級或者σ能級激發(fā)到金屬離子的空軌道,或者金屬離子的電子激發(fā)到配體的空π軌道。電荷轉移躍遷是極其強烈的,摩爾吸光系數(shù)ε一般在104-105,光譜在紫外或可見區(qū)。電荷轉移的容易程度隨配體共軛程度增大而增大。電荷轉移吸收光譜很適于痕量金屬離子的高靈敏度測定。
電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(Inductively Coupled Plasma mass spectrometer)(ICP-MS) 是一種多元素微量分析和同位素分析儀器。用電感耦合等離子體(ICP)作為離子源,元素在ICP中離子化,所產(chǎn)生的離子被引入質(zhì)譜計進行分析。這種儀器靈敏度很高,是目前進行無機元素分析的最有力工具之一。
電噴霧電離(electrospray ionization ESI) 使用電噴霧技術實現(xiàn)離子化的方法。在輸送樣品溶液的毛細管出口端與對應電極之間施加數(shù)千伏的高電壓,在毛細管出口可形成圓錐狀的液體錐(Taylor cone)。由于強電場的作用,引發(fā)正、負離子的分離,從而生成帶高電荷的液滴。在加熱氣體(干燥氣體)的作用下,液滴中的溶劑被汽化,隨著液滴體積逐漸縮小,液滴的電荷密度超過表面張力極限(雷利極限),引起液滴自發(fā)的分裂,亦可稱為"庫侖爆炸"。分裂的帶電液滴隨著溶劑的進一步變小,最終導致離子從帶電液滴中蒸發(fā)出來,產(chǎn)生單電荷或多電荷離子。質(zhì)子的加成可生成單價或多價正離子,而脫質(zhì)子可生成單價或多價負離子。
電子電離源(electron ionization source) (EI) 又稱電子轟擊離子源(electron bombardment ionization source是質(zhì)譜儀離子源中最常用的一種。簡稱EI源。主要由陰極(燈絲)、離子室、電子接收極、一組靜電透鏡組成。在高真空條件下,給燈絲加電流,使燈絲發(fā)射電子,電子從燈絲加速飛向電子接收極,在此過程中與離子室中的樣品分子發(fā)生碰撞,使樣品分子離子化或碎裂成碎片離子。為了使產(chǎn)生的離子流穩(wěn)定,電子束的能量一般設為70電子伏特,這樣可以得到穩(wěn)定的標準質(zhì)譜圖。利用電子電離源可以得到樣品的分子量信息和結構信息。但不適于分析易分解、難揮發(fā)的化合物。
頂空氣相色譜法(headspace gas chromatography GC-HS) 也稱液上氣相色譜分析,是一種對液體或固體樣品中所含揮發(fā)性成分進行氣相色譜分析的間接測定方法。將被分析樣品放在一個密閉容器中(通常為可密封的小玻璃瓶),在一恒定的溫度下達到熱力學平衡,以樣品容器上部空間的蒸汽作為樣品進行色譜分析。當樣品瓶中當液上的蒸汽壓相當?shù)蜁r,色譜峰面積Ai的大小與樣品中揮發(fā)性組分的蒸汽壓PI成正比,Ai=CiPI,式中ci是校正因子。在真實體系中,蒸汽分壓可表示為Pi=P0iχiγi,P0i為組分i的飽和蒸汽壓,χi是組分i的摩爾分數(shù),γi是組分i的活度系數(shù)。
多普勒變寬
多普勒寬度是由于原子熱運動引起的。從物理學中已知,從一個運動著的原子發(fā)出的光,如果運動方向離開觀測者,則在觀測者看來,其頻率較靜止原子所發(fā)的光的頻率低;反之,如原子向著觀測者運動,則其頻率較靜止原子發(fā)出的光的頻率為高,這就是多普勒效應。原子吸收分析中,對于火焰和石墨爐原子吸收池,氣態(tài)原子處于無序熱運動中,相對于檢測器而言,各發(fā)光原子有著不同的運動分量,即使每個原子發(fā)出的光是頻率相同的單色光,但檢測器所接受的光則是頻率略有不同的光,于是引起譜線的變寬。
端吸收(end absorption) 指由分子內(nèi)n?s*躍遷引起的對紫外區(qū)短波長端至遠紫外區(qū)的強吸收。
發(fā)光量子產(chǎn)率(luminescence quantum yield) 定義為發(fā)光物質(zhì)吸光后所發(fā)射光的光子數(shù)與所吸收的激發(fā)光的光子數(shù)之比值。在通常情況下,發(fā)光量子產(chǎn)率的數(shù)值總是小于1。發(fā)光量子產(chǎn)率的數(shù)值越大,化合物的熒光或磷光越強。不發(fā)光的物質(zhì),其發(fā)光量子產(chǎn)率的數(shù)值為零或非常接近于零。重原子的引入使熒光量子產(chǎn)率減小,磷光量子產(chǎn)率增加。
反射吸收法(reflection absorption spectroscopy)又稱RAS法。用于樣品表面、金屬板上涂層薄膜的紅外光譜測定。甚至用于單分子層的解析。入射光經(jīng)反射鏡照射到樣品表面,其反射光再經(jīng)另一反射鏡進入儀器。反射吸收測定的原理是,只有與基板垂直的偶極矩變化可以被選擇性地檢測。詳見5.3.4。
反相高效液相色譜法(reversed phase high performance liquid chromatography RP-HPLC) 由非極性固定相和極性流動相所組成的液相色譜體系。它正好與由極性固定相和弱極性流動相所組成的液相色譜體系(正相色譜)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基鍵合硅膠,典型的流動相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是當今液相色譜的最主要的分離模式,幾乎可用于所有能溶于極性或弱極性溶劑中的有機物的分離。
反相離子對色譜(reversed phase ion pair chromatography) 指用適當?shù)姆措x子與被測離子形成具有一定疏水性的離子對化合物后,采用反相高效液相色譜體系分離所形成的離子對化合物的方法。
飛行時間分析器(Time of Flight analyzer) 是一種結構最簡單的質(zhì)譜儀分析器。主要由一個長度L的無場真空管(漂移管)構成。質(zhì)荷比為m/z的離子從離子源被加速(加速電壓為V)引出后,進入無場空間,經(jīng)過一定時間t秒后到達漂移管另一端,不同質(zhì)荷比的離子因速度不同,到達固定飛行時間距離所需的時間不同,其運動方程可寫為: 當V、L不變的條件下,飛行時間t與質(zhì)荷比的平方根成正比。測定飛行時間t即可確定m/z的值。這種依據(jù)飛行時間來測定質(zhì)量的分析器叫飛行時間分析器。
飛行時間質(zhì)譜儀(Time of Flight Mass Spectrometer) (TOF) 是一種很常用的質(zhì)譜儀。這種質(zhì)譜儀的質(zhì)量分析器是一個離子漂移管。由離子源產(chǎn)生的離子加速后進入無場漂移管,并以恒定速度飛向離子接收器。離子質(zhì)量越大,到達接收器所用時間越長,離子質(zhì)量越小,到達接收器所用時間越短,根據(jù)這一原理,可以把不同質(zhì)量的離子按m/z值大小進行分離。飛行時間質(zhì)譜儀可檢測的分子量范圍大,掃描速度快,儀器結構簡單。這種飛行時間質(zhì)譜儀的主要缺點是分辨率低,因為離子在離開在離子源時初始能量不同,使得具有相同質(zhì)荷比的離子達到檢測器的時間有一定分布,造成分辨能力下降。改進的方法之一是在線性檢測器前面的加上一組靜電場反射鏡,將自由飛行中的離子反推回去,初始能量大的離子由于初始速度快,進入靜電場反射鏡的距離長,返回時的路程也就長,初始能量小的離子返回時的路程短,這樣就會在返回路程的一定位置聚焦,從而改善了儀器的分辨能力。這種帶有靜電場反射鏡的飛行時間質(zhì)譜儀被稱為反射式飛行時間質(zhì)譜儀/Reflectron time-of-flight mass spectrometer。
分光光度法(spectrophotometry) 又稱吸收光度法(absorption spectrophotometry )。是利用物質(zhì)本身對光的吸收特性或借助加入顯色劑使被測物質(zhì)顯色,根據(jù)其對不同波長單色光的吸收程度而對物質(zhì)進行定量分析的一類分析方法?捎糜谖镔|(zhì)的定性鑒定;由某物質(zhì)在一定波長處測得的吸光度與其濃度作圖得到的工作曲線可用于該物質(zhì)的定量分析。由于分光光度法靈敏較高,選擇性較好,設備簡單,在各行各業(yè)中都得到廣泛應用。
分光光度滴定(photometric titration) 將滴定操作與吸光度測量相結合的一種分析方法。將一定量的標準溶液滴定到待測溶液中,同時測定待測溶液體系在適當波長處的吸光度,通過吸光度對滴定劑用量作圖(稱光度滴定曲線)來確定反應終點的方法。它不僅能應用于配位、酸堿、氧化還原反應,有時還能用于沉淀反應。其特點是終點的確定較指示劑法更為靈敏和準確,還可以用于有色溶液的滴定。
分析器(analyzer) 質(zhì)譜儀的一個主要部件,又叫質(zhì)量分析器。它的作用是將離子源產(chǎn)生的離子按荷質(zhì)比(m/z)的差別,按空間的位置或時間的先后進行分離,以便得到按質(zhì)荷比(m/z)大小順序排列的質(zhì)譜圖。常用分析器有:磁分析器,磁場和電場組合的雙聚焦分析器,四極分析器,飛行時間分析器,離子回旋共振分析器,離子阱質(zhì)量分析器等。
粉末反射法(diffusive reflection method) 又稱擴散反射法或DF法。壓片法適用或不適用的樣品都可以用粉末反射法測定其紅外光譜,也用于微小樣品、色譜餾分的紅外光譜定性、吸著在粉末表面樣品的紅外光譜分析。該法的原理是,照射到粉末樣品上的光首先在其表面反射,一部分直接進入檢測器,另一部分進入樣品內(nèi)部多次透過、散射后再從表面射出,后者稱為擴散反射光。粉末反射法就是利用擴散散射光獲取紅外光譜的方法。與壓片法相比,該法由于測定的是多次經(jīng)過樣品的光,因此兩者的光譜強度比不同,壓片法中的弱峰有時會增強。詳見5.3.4。
傅立葉變換紅外光譜儀(Fourier transform infrared spectrometer FT-IR)光源發(fā)出的光進入Michelson干涉儀,然后經(jīng)樣品吸收后,測定光強隨動鏡移動距離的變化,再經(jīng)傅立葉變換得到物質(zhì)的紅外光譜的儀器。具有高靈敏度、高分辨率等優(yōu)點。
傅立葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀(Fourier-transform ion cyclotron resonance mass spectrometer)(FT-ICR-MS)是一種高性能的高分辨質(zhì)譜儀。亦可直接用FT-MS表示(Fourier-transform mass spectrometry)。它的核心部件是帶傅立葉變換程序的計算機和捕獲離子的分析室。分析室是一個置于強磁場中的立方體結構。離子被引入分析室后,在強磁場作用下被迫以很小的軌道半徑作圓周運動,離子的回旋頻率與離子質(zhì)量成反比,此時不產(chǎn)生可檢出信號。如果在立方體的一對面上(發(fā)射極)加一快速掃頻電壓,一對極板施加一個射頻電壓,當其頻率與離子回旋頻率相等時則發(fā)生滿足共振條件時,離子吸收射頻能量,運動軌道半徑增大,撞到檢測器產(chǎn)生可檢出信號。這種信號是一種正弦波,振幅與共振離子數(shù)目成正比。實際使用中測得的信號是在同一時間內(nèi)所對應的正弦波信號的疊加。這種信號輸入計算機進行快速傅立葉變換,利用頻率和質(zhì)量的已知關系可得到質(zhì)譜圖。傅立葉變換質(zhì)譜儀具有很高的分辨率(可達100萬以上)和很高的靈敏度,但儀器價格和維持費用也很高。
高效液相色譜法(high performance liquid chromatography HPLC)又稱高壓液相色譜法或高速液相色譜法是指具有操作簡便、分離速度快、分離效率高和檢測靈敏度高等優(yōu)良性能的液相色譜體系。液相色譜法早在1903年就由俄國植物學家Tswett發(fā)明,但早期的液相色譜法(古典液相色譜)柱效低、分離時間長,難以解決復雜樣品的分離。到了20世紀60年代中后期,粒度小而均勻、傳質(zhì)速率快的色譜填料相繼出現(xiàn),使柱效顯著提高,高壓輸液泵的使用解決了流動相流速慢的問題。從此液相色譜有了飛躍的發(fā)展,為區(qū)別于古典液相色譜法而稱高效液相色譜法。HPLC幾乎可以分離和分析任何物質(zhì),是最有效和應用最廣泛的分離分析技術。
共振拉曼(Resonance Raman Scattering)簡稱RRS 以分析物的紫外-可見吸收光譜峰的鄰近波長作為激發(fā)波長,樣品分子吸光后躍遷至高電子能級并立即回到基態(tài)的某一振動能級,產(chǎn)生共振拉曼散射。與熒光(10-6-10-8秒)相比,該過程很短(10-14秒) 。共振拉曼強度比普通的拉曼光譜法強度可提高102-106倍,檢測限可達10-8摩爾/升,因此用于高靈敏度測定以及狀態(tài)解析等,主要不足是熒光干擾。
光二極管陣列檢測
是利用光二極管陣列檢測器對光子進行檢測。光二極管陣列檢測器是一種對光子有響應的檢測器。它是由硅片上形成的反相偏置的p-n結組成。反向偏置造成了一個耗盡層,使該結的傳導性幾乎降到了零。當輻射照到n區(qū),就可形成空穴和電子?昭ㄍㄟ^耗盡層到達p區(qū)而湮滅,于是電導增加,增加的大小與輻射功率成正比。光二極管陣列檢測器每平方毫米含有15000個以上的光二極管。每個二極管都與其鄰近的二極管絕緣,它們都聯(lián)結到一個共同的n型層上。當光二極管陣列表面被電子束掃描時,每個p型柱就連接著被充電到電子束的電位,起一個充電電容器的作用。當光子打到n型表面以后形成空穴,空穴向p區(qū)移動并使沿入射輻射光路上的幾個電容器放電。然后當電子束再次掃到它們時,又使這些電容器充電。這一充電電流隨后被放大作為信號。光二極管陣列可以制成光學多道分析器。
光致發(fā)光(photoluminescence) 分子或離子等吸收紫外或可見光后,再以紫外或可見光的形式發(fā)射能量,這種現(xiàn)象稱為光致發(fā)光。一般光致發(fā)光指熒光及磷光現(xiàn)象。發(fā)光量子產(chǎn)率與激發(fā)光波長(或能量)有關,發(fā)光強度隨激發(fā)波長的變化稱為激發(fā)光譜。激發(fā)光譜與發(fā)射光譜間符合斯托克斯規(guī)則。光致發(fā)光可用于研究物質(zhì)的電子狀態(tài),發(fā)光物質(zhì)的痕量分析,發(fā)光體的分子取向,發(fā)光過程的動力學研究等等。采用發(fā)光探針,可以大大擴展光致發(fā)光的應用范圍,在生物醫(yī)學、環(huán)境科學等領域有廣闊的應用前景。
光聲效應(phtoacoustic effect) 由電話發(fā)明家A.G.Bell于1880年提出。經(jīng)調(diào)制的斷續(xù)光照射于物質(zhì)時,物質(zhì)發(fā)射與斷續(xù)光頻率相等的聲波,這種現(xiàn)象稱為光聲效應。
光散射檢測器(light scattering detector) 利用物質(zhì)微粒(包括分子)對光的散射作用進行分析的檢測器。當某一波長的光照射在物質(zhì)微粒上時,除一部分通過物質(zhì)微粒或被微粒吸收外,大部分的光將以同樣的波長向各個方向散射(瑞利散射),散射光的強度是微粒數(shù)量和微粒大小的函數(shù)。光散射檢測器是凝膠色譜中常用的檢測器之一。
固定相(stationary phase) 柱色譜或平板色譜中既起分離作用又不移動的那一相。固定相的的選擇對樣品的分離起著重要作用,有時甚至是決定性的作用。不同類型的色譜采用不同的固定相,如氣-固色譜的固定相為各種具有吸附活性的固體吸附劑;氣-液色譜的固定相是載體表面涂漬的固定液,液相色譜中的固定相為各種鍵合型的硅膠小球,離子交換色譜中的固定相為各種離子交換劑,排阻色譜中的固定相為各種不同類型的凝膠等等。
紅移(bathochromic shift) 或 red shift 指由于使用不同的溶劑或引入取代基所引起的化合物的光譜(紫外-可見吸收或熒光等)的吸收峰向長波長方向移動的現(xiàn)象,其機理可由躍遷能級的變化來闡明。例如,當化合物溶于極性溶劑時,會產(chǎn)生溶劑化作用,由于激發(fā)態(tài)和基態(tài)的電荷分布不同而使這兩種狀態(tài)的溶劑化程度不同。溶劑的極性愈大,有機分子的成鍵π軌道向反鍵π* 軌道的躍遷能愈小,即激發(fā)態(tài)的極性大于基態(tài),激發(fā)態(tài)能級降低比基態(tài)大,從而光譜發(fā)生紅移。