（二）操作方法 

1．采血法 各種動(dòng)物采血方法不一。馬、牛、羊等大動(dòng)物一般從頸靜脈采血，豬從頸靜脈、前腔靜脈或耳靜脈采血，家禽由翼下靜脈或心臟采血，兔由心臟或耳靜脈采血，犬由頸靜脈或四肢靜脈采血，豚鼠由心臟采血，小白鼠則可斷尾或剪斷腋下血管或剪斷眼球采血。

2．抗凝 采集血液最關(guān)鍵的問(wèn)題是抗凝，采用什么方法進(jìn)行抗凝，則根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求和條件而定。最常用的方法如下：

（1）肝素抗凝：采血時(shí)，使每ml血液含15U~20U肝素即可。計(jì)算采集的血液量，按1 000U/ml的量加入肝素，直接放入采血容器中，采血時(shí)，邊采血邊輕輕搖動(dòng)，使抗凝劑和血液混勻。對(duì)于采少量的血液或小動(dòng)物采血，可直接用注射器抽取一定量的肝素液，再采血直接抗凝。

（2）EDTA抗凝：采血前，用滅菌生理鹽水將EDTA配制成4％溶液，然后按預(yù)采血液的量，以每ml血液加入1mg~2mg的EDTA的液體量于采血容器內(nèi)。采血，并不斷搖動(dòng)采血容器，使之混勻。

（3）玻璃珠法：預(yù)先將適量的玻璃珠（根據(jù)采血量多少而定）清洗后，裝入采血容器中，滅菌后備用。采血過(guò)程中，邊采邊搖采血瓶，以使小玻璃珠在血液中滾動(dòng)，以機(jī)械地除去纖維蛋白，使血液不能凝固。本法雖較麻煩，但對(duì)淋巴細(xì)胞的活性影響最小，且可減少血小板的混雜。

（4）阿氏液采血：以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液，邊采邊輕輕搖動(dòng)采血瓶，使之混勻。用阿氏液采血，除了抗凝外，多用于紅細(xì)胞的保存。一般在4℃條件下，阿氏液中保存的紅細(xì)胞2周其活性和特性不變。

 

紅細(xì)胞的分離技術(shù) 

（一）材料與試劑 

1．肝素等抗凝劑

2．3％明膠液 取明膠3g，溶于0.9％滅菌鹽水100ml中，114.3℃滅菌10min，冷卻后4℃冰箱保存。臨用時(shí)，37℃預(yù)熱10min。

3．阿氏液

 

（二）操作方法 

1．采血抗凝，即為紅細(xì)胞。由于紅細(xì)胞與白細(xì)胞的比例相差懸殊，一般白細(xì)胞混雜在其中，忽略不計(jì)。

2．根據(jù)紅細(xì)胞的用途，可做進(jìn)一步的處理。如計(jì)算紅細(xì)胞，可直接稀釋計(jì)數(shù)。如需做補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)，或其它溶紅細(xì)胞反應(yīng)，則需將紅細(xì)胞進(jìn)行充分的清洗，以除去附著在紅細(xì)胞膜表面的血漿。一般用等滲的稀釋液連續(xù)清洗，2 000r/min離心10min，重復(fù)3~4次。

3．如需儲(chǔ)藏備用，則以阿氏液做抗凝劑采血，混勻后置4℃冰箱保存，可保存2周，其活性尚可。