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培養(yǎng)基既是供給細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和增殖的環(huán)境，所以非常重要。細胞培養(yǎng)液是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎上，添加了碳水化合物、氨基酸、脂類、無機鹽、維生素、微量無素和細胞生長因子等。
根據其成分、用途和性質，培養(yǎng)基可以分為以下幾類：
合成培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基的成分明確，營養(yǎng)全面，適用于各種細胞類型的培養(yǎng)。常見的合成培養(yǎng)基有MEM、DMEM、RPMI等。
天然培養(yǎng)基：天然培養(yǎng)基以動物血清或血漿為基質，添加一定量的營養(yǎng)成分，適用于某些特定細胞類型的培養(yǎng)。如添加了動物血清的DMEM稱為血清培養(yǎng)基。
無血清培養(yǎng)基：指不含任何動物來源的血清成分，以減少潛在的傳染病風險和提高實驗的可重復性。無血清培養(yǎng)基通常需要添加特定的化學添加劑來模擬血清中的作用。目前已有多種無血清培養(yǎng)基上市，如雜交瘤細胞無血清培養(yǎng)基、CHO細胞無血清培養(yǎng)基、Vero細胞無血清培養(yǎng)基等。無血清培養(yǎng)基通常添加生長附加成分，如激素與生長因子、低分子營養(yǎng)成分和轉鐵蛋白等促細胞生長的附加成分，一般包括胰島素、孕酮、硒酸鈉、腐胺、轉鐵蛋白等。
懸浮培養(yǎng)基：懸浮培養(yǎng)基適用于懸浮生長類型的細胞，如骨髓瘤細胞、雜交瘤細胞等。懸浮培養(yǎng)基中通常含有較少的營養(yǎng)成分，以維持細胞在懸浮狀態(tài)下的生長。
實體培養(yǎng)基：實體培養(yǎng)基適用于貼壁生長類型的細胞，如細胞系、原代細胞等。實體培養(yǎng)基中通常含有較多的營養(yǎng)成分，以滿足細胞在實體狀態(tài)下的生長需求。
誘導分化培養(yǎng)基：誘導分化培養(yǎng)基用于促使細胞向特定方向分化的培養(yǎng)基。通過添加分化誘導劑或改變營養(yǎng)成分的組成，可以實現(xiàn)對細胞分化的調控。
低氧培養(yǎng)基：低氧培養(yǎng)基用于模擬低氧環(huán)境，適用于某些特定細胞類型的培養(yǎng)，如血管內皮細胞、肌肉細胞等。低氧培養(yǎng)基中通常含有較低濃度的氧氣，以促進細胞在低氧條件下的生長和功能表達。
總之，培養(yǎng)基類型繁多，根據不同細胞類型和實驗需求選擇合適的培養(yǎng)基是成功進行細胞培養(yǎng)的關鍵。
那么，常用的培養(yǎng)液有哪些呢?它們的成分和特點是什么呢?它們各自的適用范圍又有哪些呢?
一、常用培養(yǎng)基
提到常用的培養(yǎng)基，其實就四種: MEM、DMEM、1640、F-12。這四種培養(yǎng)液涵蓋了90%以上的細胞。下面，分別介紹一下它們各自的成分和特點。
MEM作為四大金剛中的老大，是應用最廣泛的細胞培養(yǎng)液，其中含有13 種必須氨基酸、8 種維生素、以及多種微量元素。能力非常全面的，優(yōu)點非常突出。
老二DMEM，作為緊跟老大MEM 的二弟，含有的營養(yǎng)成分其實是一模一樣的。但是，老二青出于藍而勝于藍，濃度要高出2~4 倍。
老三1640，中規(guī)中矩，沒有什么特別的優(yōu)點，也沒有什么明顯的缺點。簡單樸素，營養(yǎng)成分比較簡單，比DMEM少一點糖和谷胱甘肽。
老四F12，它的優(yōu)點是非常突出的，同時，它的缺點也是非常明顯的。F12也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無機鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。這些都是優(yōu)點。但是，F(xiàn)12中含有硫酸亞鐵，據報道有神經毒效應。對于很多神經細胞是有毒性作用的。
二、不同的細胞用不同的培養(yǎng)基
MEM 可以用于絕大多數的細胞，特別適合于很多種哺乳動物細胞培養(yǎng)。 DMEM 是在MEM 的基礎上發(fā)展而來的，double了原來各成分的含量。分高糖型（含葡萄糖4500mg/L）和低糖型（含葡萄糖1000mg/L）兩種，高糖型適用于生長較快，附著性較差的腫瘤細胞，但是又不希望他脫離原來生長點的克隆培養(yǎng)，所以常用于雜交瘤技術中骨髓瘤細胞和DNA 轉染的轉化細胞。低糖型對于生長速度較快、附著性差的腫瘤細胞有利。1640 培養(yǎng)液最初為培養(yǎng)小鼠白血病細胞而制備。開始的配方特別適合懸浮細胞的生長，主要針對淋巴細胞。其組成較為簡單。但是，正是因為其簡單，才可以適應很多種類細胞的生長。特別是主要用于一些懸浮細胞培養(yǎng)以及monolayer culture of human leukemic cells。
1640和DMEM的區(qū)別：
DMEM主要適用于肝臟、腎臟、肺、心臟等多種類型的哺乳動物細胞系的培養(yǎng)。DMEM中含有較高濃度的葡萄糖(4500mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營養(yǎng)物質。
此外，DMEM還添加了丙酮酸和乳酸等緩沖劑，能夠保持細胞在較寬的pH范圍內正常生長。
RPMI-1640，適用于淋巴細胞、骨髓細胞、白血病細胞等多種類型的哺乳動物細胞系的培養(yǎng)。RPMI-1640中含有較低濃度的葡萄糖（2000mg/L）、氨基酸、維生素和微量元素等營養(yǎng)物質。此外，RPMI-1640還添加了緩沖劑HEPES和碳酸氫鹽，能夠保持細胞在較窄的pH范圍內正常生長。
DMEM和RPMI-1640在營養(yǎng)成分和緩沖劑的配比上有所不同，上述提到它們各自適合培養(yǎng)的細胞種類是經過大量實驗驗證得到的結果，建議遵照執(zhí)行即可。
但這也并不代表用錯了培養(yǎng)基細胞就一定會死掉，因為DMEM和1640只是在少數成分上做了針對優(yōu)化，對于大部分細胞株，即使用錯，也只是不那么合適而已。
F-12，最初開發(fā)用于支持CHO、Hela 和L-細胞生長，F(xiàn)-12 還用于培養(yǎng)原代大鼠肝細胞和前列腺上皮細胞增殖。MEM和F12聯(lián)手，還是神經生物學最通用的培養(yǎng)基呢。MEM 和 F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2，就形成神經生物學最通用的培養(yǎng)基。已經成功的培養(yǎng)了外周神經元。
表1 不同的細胞系對應的不同的培養(yǎng)液
關于細胞培養(yǎng)液，一般的細胞系用 1640、DMEM 均可，90%以上的細胞都可以養(yǎng)的很好，包括原代腫瘤細胞。需要特殊培養(yǎng)基的細胞，在文獻里一般都會注明的。大家照著文獻選用即可。
三、如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基？
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在 MEM 中培養(yǎng)的細胞，很可能在 DMEM 或 M199 中同樣很容易生長�？傊走x MEM 做粘附細胞培養(yǎng)，RPMI-1640 做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始。
四、什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為 PH 值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素)。為避免固醇類反應，培養(yǎng)細胞，尤其是哺乳類細胞時，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細胞檢測時，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
五、細胞培養(yǎng)基的配制和儲存應該注意什么？
細胞培養(yǎng)基配好后，要先抽取少許放入培養(yǎng)瓶內在37℃培養(yǎng)箱內放置24~48h，已檢測培養(yǎng)液是否有污染，然后方可用于實驗。配置培養(yǎng)基所需的血清要合格并且保持穩(wěn)定。一個批號試用效果良好后，就可一次購入較多同一批號的血清，這樣實驗條件穩(wěn)定，配液時調整pH值較容易。每次配液量以使用兩周左右的量為宜，一次配液不要太多，一是短期內用不完造成營養(yǎng)成分損失需要補充，二是量大易造成污染。
六、為何培養(yǎng)基保存于 4 ℃ 冰箱中，顏色會偏紫色？
培養(yǎng)基保存于 4 ℃ 冰箱中，培養(yǎng)基內的 CO2 會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性，而培養(yǎng)基中的酸堿指示劑 (通常為 phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏紫色。培養(yǎng)基偏堿的結果， 將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾 CO2，以調整 pH 值。
七、什么情況下用到無血清培養(yǎng)基？
對于應用培養(yǎng)細胞進行分離制備細胞生長因子、單克隆抗體等應該選擇無血清培養(yǎng)基。
