HPLC分析儀器的普及和其在自動(dòng)化程度的提高,自動(dòng)進(jìn)樣模式取代了原來手動(dòng)模式,它大大提高了工作效率,增強(qiáng)了分析的精度,消除了人為誤差等等優(yōu)勢,越來越多的單位使用自動(dòng)進(jìn)樣器。與此同時(shí),自動(dòng)進(jìn)樣器有時(shí)出現(xiàn)的故障往往會(huì)使人頭疼。要弄清楚故障發(fā)生的原因,有效地解決它的故障,首先要從日常維護(hù)和保養(yǎng)著手。
自動(dòng)進(jìn)樣器常規(guī)維護(hù)
1.及時(shí)清洗色譜系統(tǒng)平時(shí)分析好樣品,清洗好色譜柱后,用一根PEEK管連接在原先接色譜柱位置,用脫氣的純水以1.5mL/min流速清洗1.5小時(shí),后用甲醇用同樣條件清洗。自動(dòng)進(jìn)樣器清洗液換上甲醇,打開排液閥,用針筒抽吸越50mL,再關(guān)閉排液閥,purge,rinse各三次,結(jié)束后按shift,9,關(guān)閉自動(dòng)進(jìn)樣器。純水清洗色譜系統(tǒng)能清除管路中殘存的緩沖鹽,甲醇清洗,防止系統(tǒng)滋生細(xì)菌和微生物堵塞管路,也可以洗去不溶于水的物質(zhì)。2. 定期更換Septum cutout定期更換Septum cutout,即Rinse口帽中的橡皮墊,分析樣品設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣中有洗針的程序,所以一段時(shí)間后橡皮墊很容易臟。及時(shí)更換避免墊上臟物污染針頭。3.定期更換進(jìn)樣隔墊定期更換進(jìn)樣隔墊。用固定扳手把進(jìn)樣口帽卸下,把里面的進(jìn)樣口襯筒sleeve取出,取下舊的進(jìn)樣墊,把新的原樣裝入,并原樣裝在進(jìn)樣口,用手把螺母擰緊,用扳手再擰約15°。4.定期涂抹潤滑油用吸水紙插干凈控制進(jìn)樣針的升降軸上的油污和垃圾,用少量潤滑油涂于升降軸上,涂好之后用吸水紙吸去多余的潤滑油。測試幾個(gè)樣品,聽升降軸工作時(shí)聲音清脆和聲音有規(guī)律為佳。5.純甲醇清洗長期不用機(jī)器長期不用機(jī)器可以用純甲醇代替清洗液,針筒抽吸約100mL清洗液,后purge 和rinse幾次。注:Rinse口螺帽和進(jìn)樣口襯筒及進(jìn)樣口螺帽若有鹽析或附臟物,先用純水,后異丙醇或甲醇放超聲波超洗10分鐘。洗去臟物后晾干裝上。6.及時(shí)更換計(jì)量泵密封墊圈及時(shí)更換計(jì)量泵密封墊圈:更換這個(gè)位置的密封墊圈時(shí)要注意,與泵不同的是,使用者先要進(jìn)入儀器的診斷維護(hù)界面,把計(jì)量泵內(nèi)的柱塞桿收回去再拆卸計(jì)量泵,否則拆下來的時(shí)候柱塞桿處于受壓縮的位置,安裝的時(shí)候就麻煩了。計(jì)量泵的使用頻率非常的低,幾乎可以低到忽略不計(jì),但是這個(gè)密封墊圈一樣會(huì)有磨損,使用三五年的儀器有時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)這個(gè)位置漏液,但是這種問題發(fā)生的頻率非常低。7.通閥維護(hù)進(jìn)樣速度要快。注射器進(jìn)樣時(shí)必須采用平頭針。使用部分裝液法進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量多為定量管體積的75%,如果25μL的定量管多進(jìn)樣15μL,并且要求每次進(jìn)樣體積準(zhǔn)確、相同;一般情況下不要輕易拆卸閥體,如果孔已經(jīng)阻塞或需要更換磨損部件是才能才開閥。樣品溶液均要用0.45μm的過濾器過濾,防止微粒阻塞進(jìn)樣閥和減少對進(jìn)樣閥的磨損。經(jīng)常清洗進(jìn)樣閥,氣相色譜儀長時(shí)間不使用或環(huán)境溫度較高時(shí),導(dǎo)致閥內(nèi)殘存的淋洗液中的溶液揮發(fā),鹽濃度增加形成結(jié)晶析出。當(dāng)然在日常工作中必然會(huì)出現(xiàn)一些故障,這些故障一開始會(huì)使我們束手無策。但是當(dāng)我們冷靜下來,一點(diǎn)點(diǎn)排查原因,會(huì)發(fā)現(xiàn)其實(shí)有些問題很容易解決。以下是小編收集的一些易發(fā)生的問題和解決方法,這里寫出來與大家共同探討。
自動(dòng)進(jìn)樣器常見的故障和解決辦法
1.基線不穩(wěn),鬼峰增多現(xiàn)象:Fig1 a 和Fig1 b分析的是同一標(biāo)準(zhǔn)品。Fig1 a基線不穩(wěn),鬼峰增多;而Fig1 b基線穩(wěn)定,為正常圖譜。Fig1 a是基線不穩(wěn),鬼峰增多的圖譜Fig1 b是正常的圖譜,同時(shí)是清洗干凈后的圖譜原因:在排除了泵,流動(dòng)相和檢測器問題后,這種現(xiàn)象說明進(jìn)樣系統(tǒng)被污染了。解決方法:用5%的高氯酸水溶液代替原來的自動(dòng)進(jìn)樣器的清洗液,用針筒抽吸約100mL,在樣品瓶中裝入上述清洗液,用一根塑料阻尼管代替色譜柱,阻尼管出口處連廢液,不接檢測器。打開泵,設(shè)置一個(gè)常規(guī)流速。設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣程序,進(jìn)樣量200μL,分析時(shí)間1分鐘,連續(xù)20次。結(jié)束后把清洗液換成純水,樣品瓶中裝純水,依上述同樣操作,(考慮到進(jìn)樣量較多,且重復(fù)次數(shù)多,準(zhǔn)備5個(gè)裝適量液體的樣品瓶,放入樣品盤中,設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣程序,每個(gè)瓶連續(xù)抽4次,5個(gè)樣品瓶合計(jì)抽20次,避免吸空)。說明:5%的高氯酸水溶液能夠有效地去除系統(tǒng)中的污垢,如若無高氯酸,可用甲醇,純水大進(jìn)樣量多次清洗,也能起到同樣的效果。2.泵壓力突然降至0或很小現(xiàn)象:在一次連續(xù)分析樣品過程中,開始分析時(shí)系統(tǒng)很正常,但是到分析第八個(gè)樣品時(shí)突然發(fā)現(xiàn)泵壓降至0.3Mpa,而正常時(shí)泵壓為5.5Mpa。聞到進(jìn)樣器中有甲醇味(流動(dòng)相中甲醇含量很大)。打開進(jìn)樣器門,發(fā)現(xiàn)排液閥下面的管子有液體滴出,帶有甲醇味,停止系統(tǒng),按shift+9發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣口和rinse口鹽析很厲害。原因:進(jìn)樣口被堵,流動(dòng)相無法進(jìn)入色譜柱,滲漏出來,致使泵壓下降。解決方法:根據(jù)自動(dòng)進(jìn)樣器常規(guī)維護(hù)3.和4.操作,更換進(jìn)樣隔墊和Septumcutout(若沒有備件,進(jìn)樣口密封圈和rinse口隔墊用純水→甲醇超洗干凈。)用擦鏡紙沾純水擦干凈進(jìn)樣口和rinse口旁的鹽析,再用甲醇擦洗。裝上兩個(gè)部件,打開機(jī)器調(diào)試,無滲漏,泵壓正常即可。3. 進(jìn)樣重現(xiàn)性不佳原因:1)計(jì)量泵不準(zhǔn);2)六位閥磨損。解決方法:1)計(jì)量泵吸液準(zhǔn)確性判斷。在樣品瓶中裝入足量的純水,擦干凈外面的水分,用分析天平稱量,記錄讀數(shù)W1,放入進(jìn)樣盤,設(shè)置進(jìn)樣程序,進(jìn)樣量100μL,連續(xù)十次,結(jié)束后濾紙擦干樣品瓶表面的水分,置天平稱量,得讀數(shù)W2,W1-W2得的數(shù)值應(yīng)為1mL純水在相應(yīng)溫度的質(zhì)量。若差別不大,則計(jì)量泵無礙。若計(jì)量泵有問題,有可能計(jì)量泵柱塞桿或密封圈有問題。2)六位閥磨損。根據(jù)自動(dòng)進(jìn)樣器說明書,拆下六位閥,觀察是否三個(gè)口有磨損,若磨損嚴(yán)重,則更換新的六位閥,根據(jù)書上的操作,裝配好,調(diào)試,重現(xiàn)性良好即可。4.針座堵塞針座堵塞的問題相信很多人都遇到過,有時(shí)候不小心錯(cuò)用了硬質(zhì)塑料小瓶蓋或者是瓶蓋上的進(jìn)樣墊重復(fù)使用很多次,進(jìn)樣針針頭扎下去的時(shí)候,會(huì)把瓶蓋或瓶墊的碎屑吸到針孔里去,針頭落到針座上去以后,流動(dòng)相經(jīng)過100ul定量環(huán)流經(jīng)針座,碎屑被帶到針座入口,造成針座堵塞、系統(tǒng)壓力過高或者針座漏液。超凈工作臺(tái)發(fā)現(xiàn)問題以后,進(jìn)入儀器診斷界面,把針頭提起來,離開針座,去掉自動(dòng)進(jìn)樣器模塊的前蓋,拆掉針座連接六通閥的螺釘,用力把針座取下,將針座倒接到液相泵上,流速設(shè)置為5ml/min加壓,一般的堵塞物都能立刻就給沖洗下來,如果沖不下來可以將針座放到超聲儀里超聲,然后再接泵沖,或者干脆延長管路,邊接泵沖邊超聲,有一次我甚至是邊用泵沖邊超聲邊用氣相手動(dòng)進(jìn)樣針的針芯去捅那個(gè)針座入口才最終把里邊的堵塞物給弄出來,然后裝回去就一切OK了。5.機(jī)械故障自動(dòng)進(jìn)樣器的機(jī)械手臂上的問題,仔細(xì)觀察進(jìn)樣器機(jī)械手臂工作時(shí)的運(yùn)動(dòng),主要包括橫向和縱向,這些運(yùn)動(dòng)都依靠皮帶、齒輪和絲杠來完成。自動(dòng)進(jìn)樣器機(jī)械故障主要由空氣中的灰塵引起,空氣中的灰塵吸附在皮帶、絲杠和齒輪上,增大了摩擦,嚴(yán)重時(shí)直接導(dǎo)致預(yù)定的動(dòng)作不能完成,甚至儀器開機(jī)時(shí)自動(dòng)進(jìn)樣器自檢都不能通過,出現(xiàn)這種問題可以把儀器關(guān)掉,用干凈的不掉纖維的無紡布去擦拭絲杠、皮帶和齒輪等傳動(dòng)裝置,擦不到的地方可以用手拉動(dòng)皮帶,然后再擦,有經(jīng)驗(yàn)的可以把儀器外殼拆開來擦拭。注意:千萬不要往絲杠上隨意抹潤滑油,因?yàn)闈櫥捅旧頃?huì)加重灰塵的吸附。擦完以后重啟儀器試一下,很多時(shí)候問題都能解決。至于更復(fù)雜的機(jī)械臂定位不準(zhǔn)或者無法抓取小瓶等問題,最好由專門的工程師上門來做維修了。對于自動(dòng)進(jìn)樣器的維護(hù)保養(yǎng)和故障排除是一次次經(jīng)驗(yàn)的積累。高效液相色譜的各個(gè)組件是互相聯(lián)系的,如果一個(gè)部件有問題或被污染,被堵塞,可能會(huì)影響后面的部件,同時(shí)也要檢查前面的部件是否有問題。比如基線不穩(wěn),要檢查檢測器是否被污染,檢查流動(dòng)相有沒有問題,進(jìn)樣器是否臟了,色譜柱是否被污染,色譜柱是否沒有穩(wěn)定好,環(huán)境溫度是否穩(wěn)定等等。所以有時(shí)查問題比機(jī)器維修更難。這就要我們在工作中多多積累經(jīng)驗(yàn),多觀察,多動(dòng)腦筋。這才能熟悉您的機(jī)器,更好地用好機(jī)器。
文章來源:網(wǎng)絡(luò)
自動(dòng)進(jìn)樣器常規(guī)維護(hù)
1.及時(shí)清洗色譜系統(tǒng)平時(shí)分析好樣品,清洗好色譜柱后,用一根PEEK管連接在原先接色譜柱位置,用脫氣的純水以1.5mL/min流速清洗1.5小時(shí),后用甲醇用同樣條件清洗。自動(dòng)進(jìn)樣器清洗液換上甲醇,打開排液閥,用針筒抽吸越50mL,再關(guān)閉排液閥,purge,rinse各三次,結(jié)束后按shift,9,關(guān)閉自動(dòng)進(jìn)樣器。純水清洗色譜系統(tǒng)能清除管路中殘存的緩沖鹽,甲醇清洗,防止系統(tǒng)滋生細(xì)菌和微生物堵塞管路,也可以洗去不溶于水的物質(zhì)。2. 定期更換Septum cutout定期更換Septum cutout,即Rinse口帽中的橡皮墊,分析樣品設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣中有洗針的程序,所以一段時(shí)間后橡皮墊很容易臟。及時(shí)更換避免墊上臟物污染針頭。3.定期更換進(jìn)樣隔墊定期更換進(jìn)樣隔墊。用固定扳手把進(jìn)樣口帽卸下,把里面的進(jìn)樣口襯筒sleeve取出,取下舊的進(jìn)樣墊,把新的原樣裝入,并原樣裝在進(jìn)樣口,用手把螺母擰緊,用扳手再擰約15°。4.定期涂抹潤滑油用吸水紙插干凈控制進(jìn)樣針的升降軸上的油污和垃圾,用少量潤滑油涂于升降軸上,涂好之后用吸水紙吸去多余的潤滑油。測試幾個(gè)樣品,聽升降軸工作時(shí)聲音清脆和聲音有規(guī)律為佳。5.純甲醇清洗長期不用機(jī)器長期不用機(jī)器可以用純甲醇代替清洗液,針筒抽吸約100mL清洗液,后purge 和rinse幾次。注:Rinse口螺帽和進(jìn)樣口襯筒及進(jìn)樣口螺帽若有鹽析或附臟物,先用純水,后異丙醇或甲醇放超聲波超洗10分鐘。洗去臟物后晾干裝上。6.及時(shí)更換計(jì)量泵密封墊圈及時(shí)更換計(jì)量泵密封墊圈:更換這個(gè)位置的密封墊圈時(shí)要注意,與泵不同的是,使用者先要進(jìn)入儀器的診斷維護(hù)界面,把計(jì)量泵內(nèi)的柱塞桿收回去再拆卸計(jì)量泵,否則拆下來的時(shí)候柱塞桿處于受壓縮的位置,安裝的時(shí)候就麻煩了。計(jì)量泵的使用頻率非常的低,幾乎可以低到忽略不計(jì),但是這個(gè)密封墊圈一樣會(huì)有磨損,使用三五年的儀器有時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)這個(gè)位置漏液,但是這種問題發(fā)生的頻率非常低。7.通閥維護(hù)進(jìn)樣速度要快。注射器進(jìn)樣時(shí)必須采用平頭針。使用部分裝液法進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量多為定量管體積的75%,如果25μL的定量管多進(jìn)樣15μL,并且要求每次進(jìn)樣體積準(zhǔn)確、相同;一般情況下不要輕易拆卸閥體,如果孔已經(jīng)阻塞或需要更換磨損部件是才能才開閥。樣品溶液均要用0.45μm的過濾器過濾,防止微粒阻塞進(jìn)樣閥和減少對進(jìn)樣閥的磨損。經(jīng)常清洗進(jìn)樣閥,氣相色譜儀長時(shí)間不使用或環(huán)境溫度較高時(shí),導(dǎo)致閥內(nèi)殘存的淋洗液中的溶液揮發(fā),鹽濃度增加形成結(jié)晶析出。當(dāng)然在日常工作中必然會(huì)出現(xiàn)一些故障,這些故障一開始會(huì)使我們束手無策。但是當(dāng)我們冷靜下來,一點(diǎn)點(diǎn)排查原因,會(huì)發(fā)現(xiàn)其實(shí)有些問題很容易解決。以下是小編收集的一些易發(fā)生的問題和解決方法,這里寫出來與大家共同探討。
自動(dòng)進(jìn)樣器常見的故障和解決辦法
1.基線不穩(wěn),鬼峰增多現(xiàn)象:Fig1 a 和Fig1 b分析的是同一標(biāo)準(zhǔn)品。Fig1 a基線不穩(wěn),鬼峰增多;而Fig1 b基線穩(wěn)定,為正常圖譜。Fig1 a是基線不穩(wěn),鬼峰增多的圖譜Fig1 b是正常的圖譜,同時(shí)是清洗干凈后的圖譜原因:在排除了泵,流動(dòng)相和檢測器問題后,這種現(xiàn)象說明進(jìn)樣系統(tǒng)被污染了。解決方法:用5%的高氯酸水溶液代替原來的自動(dòng)進(jìn)樣器的清洗液,用針筒抽吸約100mL,在樣品瓶中裝入上述清洗液,用一根塑料阻尼管代替色譜柱,阻尼管出口處連廢液,不接檢測器。打開泵,設(shè)置一個(gè)常規(guī)流速。設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣程序,進(jìn)樣量200μL,分析時(shí)間1分鐘,連續(xù)20次。結(jié)束后把清洗液換成純水,樣品瓶中裝純水,依上述同樣操作,(考慮到進(jìn)樣量較多,且重復(fù)次數(shù)多,準(zhǔn)備5個(gè)裝適量液體的樣品瓶,放入樣品盤中,設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣程序,每個(gè)瓶連續(xù)抽4次,5個(gè)樣品瓶合計(jì)抽20次,避免吸空)。說明:5%的高氯酸水溶液能夠有效地去除系統(tǒng)中的污垢,如若無高氯酸,可用甲醇,純水大進(jìn)樣量多次清洗,也能起到同樣的效果。2.泵壓力突然降至0或很小現(xiàn)象:在一次連續(xù)分析樣品過程中,開始分析時(shí)系統(tǒng)很正常,但是到分析第八個(gè)樣品時(shí)突然發(fā)現(xiàn)泵壓降至0.3Mpa,而正常時(shí)泵壓為5.5Mpa。聞到進(jìn)樣器中有甲醇味(流動(dòng)相中甲醇含量很大)。打開進(jìn)樣器門,發(fā)現(xiàn)排液閥下面的管子有液體滴出,帶有甲醇味,停止系統(tǒng),按shift+9發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣口和rinse口鹽析很厲害。原因:進(jìn)樣口被堵,流動(dòng)相無法進(jìn)入色譜柱,滲漏出來,致使泵壓下降。解決方法:根據(jù)自動(dòng)進(jìn)樣器常規(guī)維護(hù)3.和4.操作,更換進(jìn)樣隔墊和Septumcutout(若沒有備件,進(jìn)樣口密封圈和rinse口隔墊用純水→甲醇超洗干凈。)用擦鏡紙沾純水擦干凈進(jìn)樣口和rinse口旁的鹽析,再用甲醇擦洗。裝上兩個(gè)部件,打開機(jī)器調(diào)試,無滲漏,泵壓正常即可。3. 進(jìn)樣重現(xiàn)性不佳原因:1)計(jì)量泵不準(zhǔn);2)六位閥磨損。解決方法:1)計(jì)量泵吸液準(zhǔn)確性判斷。在樣品瓶中裝入足量的純水,擦干凈外面的水分,用分析天平稱量,記錄讀數(shù)W1,放入進(jìn)樣盤,設(shè)置進(jìn)樣程序,進(jìn)樣量100μL,連續(xù)十次,結(jié)束后濾紙擦干樣品瓶表面的水分,置天平稱量,得讀數(shù)W2,W1-W2得的數(shù)值應(yīng)為1mL純水在相應(yīng)溫度的質(zhì)量。若差別不大,則計(jì)量泵無礙。若計(jì)量泵有問題,有可能計(jì)量泵柱塞桿或密封圈有問題。2)六位閥磨損。根據(jù)自動(dòng)進(jìn)樣器說明書,拆下六位閥,觀察是否三個(gè)口有磨損,若磨損嚴(yán)重,則更換新的六位閥,根據(jù)書上的操作,裝配好,調(diào)試,重現(xiàn)性良好即可。4.針座堵塞針座堵塞的問題相信很多人都遇到過,有時(shí)候不小心錯(cuò)用了硬質(zhì)塑料小瓶蓋或者是瓶蓋上的進(jìn)樣墊重復(fù)使用很多次,進(jìn)樣針針頭扎下去的時(shí)候,會(huì)把瓶蓋或瓶墊的碎屑吸到針孔里去,針頭落到針座上去以后,流動(dòng)相經(jīng)過100ul定量環(huán)流經(jīng)針座,碎屑被帶到針座入口,造成針座堵塞、系統(tǒng)壓力過高或者針座漏液。超凈工作臺(tái)發(fā)現(xiàn)問題以后,進(jìn)入儀器診斷界面,把針頭提起來,離開針座,去掉自動(dòng)進(jìn)樣器模塊的前蓋,拆掉針座連接六通閥的螺釘,用力把針座取下,將針座倒接到液相泵上,流速設(shè)置為5ml/min加壓,一般的堵塞物都能立刻就給沖洗下來,如果沖不下來可以將針座放到超聲儀里超聲,然后再接泵沖,或者干脆延長管路,邊接泵沖邊超聲,有一次我甚至是邊用泵沖邊超聲邊用氣相手動(dòng)進(jìn)樣針的針芯去捅那個(gè)針座入口才最終把里邊的堵塞物給弄出來,然后裝回去就一切OK了。5.機(jī)械故障自動(dòng)進(jìn)樣器的機(jī)械手臂上的問題,仔細(xì)觀察進(jìn)樣器機(jī)械手臂工作時(shí)的運(yùn)動(dòng),主要包括橫向和縱向,這些運(yùn)動(dòng)都依靠皮帶、齒輪和絲杠來完成。自動(dòng)進(jìn)樣器機(jī)械故障主要由空氣中的灰塵引起,空氣中的灰塵吸附在皮帶、絲杠和齒輪上,增大了摩擦,嚴(yán)重時(shí)直接導(dǎo)致預(yù)定的動(dòng)作不能完成,甚至儀器開機(jī)時(shí)自動(dòng)進(jìn)樣器自檢都不能通過,出現(xiàn)這種問題可以把儀器關(guān)掉,用干凈的不掉纖維的無紡布去擦拭絲杠、皮帶和齒輪等傳動(dòng)裝置,擦不到的地方可以用手拉動(dòng)皮帶,然后再擦,有經(jīng)驗(yàn)的可以把儀器外殼拆開來擦拭。注意:千萬不要往絲杠上隨意抹潤滑油,因?yàn)闈櫥捅旧頃?huì)加重灰塵的吸附。擦完以后重啟儀器試一下,很多時(shí)候問題都能解決。至于更復(fù)雜的機(jī)械臂定位不準(zhǔn)或者無法抓取小瓶等問題,最好由專門的工程師上門來做維修了。對于自動(dòng)進(jìn)樣器的維護(hù)保養(yǎng)和故障排除是一次次經(jīng)驗(yàn)的積累。高效液相色譜的各個(gè)組件是互相聯(lián)系的,如果一個(gè)部件有問題或被污染,被堵塞,可能會(huì)影響后面的部件,同時(shí)也要檢查前面的部件是否有問題。比如基線不穩(wěn),要檢查檢測器是否被污染,檢查流動(dòng)相有沒有問題,進(jìn)樣器是否臟了,色譜柱是否被污染,色譜柱是否沒有穩(wěn)定好,環(huán)境溫度是否穩(wěn)定等等。所以有時(shí)查問題比機(jī)器維修更難。這就要我們在工作中多多積累經(jīng)驗(yàn),多觀察,多動(dòng)腦筋。這才能熟悉您的機(jī)器,更好地用好機(jī)器。
文章來源:網(wǎng)絡(luò)