1.波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢驗(yàn)：

分光光度計(jì)在使用過程中，由于機(jī)械振動(dòng)、溫度變化、燈絲變形、燈座松動(dòng)或更換燈泡等原因，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實(shí)際通過溶液的波長(zhǎng)不符合的現(xiàn)象，因而導(dǎo)致儀器靈明度降低，影響測(cè)定結(jié)果的精度，需要進(jìn)行檢驗(yàn)。

檢驗(yàn)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度最簡(jiǎn)單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測(cè)量?jī)x器的吸收峰值, 如果測(cè)出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定，則需要進(jìn)行波長(zhǎng)調(diào)節(jié)。

2.透射比正確度的檢驗(yàn)：

用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10 %、20 %、30 %左右的光譜中性濾光片，可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長(zhǎng)處，以空氣為參比，分別測(cè)量各濾光片的透射比，紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長(zhǎng)處，以高氯酸溶液為參比，測(cè)量其透射比。

3.穩(wěn)定度的檢驗(yàn)：

在零點(diǎn)不受光的條件下，用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點(diǎn)，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點(diǎn)穩(wěn)定性。在儀器測(cè)量范圍兩端向中間靠10nm處，調(diào)節(jié)零點(diǎn)后，蓋上樣品室蓋(打開光門)，使光電管受光，調(diào)節(jié)透射比為95%（數(shù)顯儀器調(diào)至100%）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩(wěn)定性。 

4.光的檢驗(yàn)：

可見分光計(jì)棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計(jì)在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片，以空氣為參比，測(cè)量其透射比值，即為儀器在相應(yīng)波長(zhǎng)下的雜散輻射率。

使用分光光度計(jì)的步驟與方法

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• 預(yù)熱儀器：

為使測(cè)定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。

• 選定波長(zhǎng)：

根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。

• 固定靈敏度檔：

根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2～0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動(dòng)靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。

• 調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)：

輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。

• 調(diào)節(jié)T=100%：

將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的第一格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100%，即，表頭指針恰好指在T=100%處。

• 測(cè)定：

輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針?biāo)�示為該有色溶液的吸光度A，讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋。

• 關(guān)機(jī)：

實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

使用分光光度計(jì)都有什么注意事項(xiàng)？

1）為了防止光電管疲勞：

不測(cè)定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷，以延長(zhǎng)光電管使用壽命。

2）比色皿的使用方法：

①拿比色皿時(shí)：

手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。

②清洗比色皿時(shí)：

一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如，比色皿被有機(jī)物沾污，可用鹽酸－乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)立即洗凈比色皿。

③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干：

以保護(hù)透光面。

④測(cè)定有色溶液吸光度時(shí)：

一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測(cè)定一系列溶液的吸光度時(shí)，通常都按由稀到濃的順序測(cè)定，以減小測(cè)量誤差。

⑤在實(shí)際分析工作中：

通常根據(jù)溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。

分光光度計(jì)的維護(hù)和保養(yǎng)

分光光度計(jì)是精密儀器，正確安裝、使用和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度有重要作用。

1.對(duì)儀器工作環(huán)境的要求

分光光度計(jì)應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺(tái)上，(周圍不應(yīng)有強(qiáng)磁場(chǎng), 以防電磁干擾)，室內(nèi)溫度應(yīng)保持在(10～30)℃。室內(nèi)應(yīng)干燥，相對(duì)濕度宜控制在<85 %，室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體，光線不宜過強(qiáng)。

2.儀器保養(yǎng)和維護(hù)方法

(1)儀器工作電壓一般為220V，允許±10 %的電壓波動(dòng)。為保持光源燈和檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，在電源電壓波動(dòng)較大的實(shí)驗(yàn)室最好配備穩(wěn)壓器。

(2)為了延長(zhǎng)光源使用壽命，在不用時(shí)不用開光源燈。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附，若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。

(3)單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內(nèi)，不能拆開，為防止色散元件受潮發(fā)霉，必須經(jīng)常更換干燥劑。

(4)必須正確使用吸收池，保護(hù)吸收池光學(xué)面。

(5)光電轉(zhuǎn)換元件不能長(zhǎng)時(shí)間曝光，應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。