實(shí)驗(yàn)小妙招丨滅菌后小倒管內(nèi)留有氣泡原因及解決辦法!
原因一:高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠
壓鍋在滅菌過程中產(chǎn)生的最大壓力不夠,不能將小倒管內(nèi)的氣體擠出,導(dǎo)致滅菌后任留有小氣泡。此外,高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達(dá)不到滅菌溫度,也會(huì)出現(xiàn)類似現(xiàn)象。
使用檢查滅菌效果的用品-壓力蒸汽滅菌指示卡,對(duì)高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
原因二:試管塞塞得太緊
在滅菌時(shí),試管塞塞得太緊(有些硅膠塞與試管不配套)會(huì)導(dǎo)致試管內(nèi)壓力與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。當(dāng)滅菌鍋升溫升壓時(shí),鍋內(nèi)壓力會(huì)大于試管內(nèi)壓力,試管內(nèi)壓力不夠,不能將小倒管內(nèi)氣體排盡,就留有氣泡;當(dāng)滅菌鍋降溫降壓時(shí),鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力,可能會(huì)使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報(bào)廢。
改用塑料帽、不銹鋼管帽,或者與試管相匹配的硅膠塞。
原因三:小倒管口太小
小倒管在加熱加壓后,一方面液體培養(yǎng)基要進(jìn)入小倒管,另一方面小倒管內(nèi)部的空氣要被排出,如果小倒管管口太小,液體不容易進(jìn)去,里面的空氣不容易被排出,就會(huì)導(dǎo)致有小氣泡生成。
改用開口比較大的倒管。
原因四:培養(yǎng)基質(zhì)量引起一系列問題
由培養(yǎng)基質(zhì)量引起的氣體不能排盡或培養(yǎng)基含有高溫高壓分解產(chǎn)氣的成分。滅菌時(shí)用水做培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn),若培養(yǎng)基組有氣泡,而對(duì)照組沒有氣泡,可確定是有此原因引起。
改用其它培養(yǎng)基。
原因五:過早打開滅菌鍋
當(dāng)滅菌鍋壓力表示數(shù)為0而溫度表示數(shù)還高與室溫時(shí),不要打開滅菌鍋。因?yàn)榇蜷_鍋蓋瞬間,鍋內(nèi)大量熱量散出,溫度突然降低,試管內(nèi)溫度也隨著降低,導(dǎo)致管內(nèi)氣壓減小,沸點(diǎn)降低,部分水會(huì)汽化留在小導(dǎo)管內(nèi)。
等滅菌鍋內(nèi)氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開滅菌鍋。
最后
盡量不要采用將滅菌后的試管顛倒或大角度傾斜的方式,使小倒管內(nèi)氣體排出。此種方法可能會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基通過試管口或試管塞受到污染,或者導(dǎo)致試管內(nèi)液體流出。
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