一、維生素B1的測定
VB1又叫硫胺素
1、食品中VB1的存在形式
⑴ 常以游離態(tài)存在;
⑵復(fù)合脂形式存在(磷蛋白);
⑶ 輔羧酶形式存在
VB1在酵母、米糠、麥胚、花生、黃豆以及綠色的蔬菜和牛乳、蛋黃中比較豐富,動物組織不如植物含量豐富。
2、VB1的性質(zhì)
⑴ VB1在中性、堿性下不穩(wěn)定,易分解;
⑵ VB1在酸性條件下穩(wěn)定,即使加熱酸性也穩(wěn)定;
⑶ VB1為白色結(jié)晶,微溶于C2H5OH,不溶于乙醚或CHCl3,易溶于水。
3、VB1的測定
世界各國都用熒光法測定
⑴ 原理:硫胺素在堿性鐵氰化鉀溶液中,被氧化成一種蘭色熒光物質(zhì),即為硫色素,在紫外光
下,硫色素發(fā)出熒光。
⑵ 方法
① 萃取
100g樣品于干燥燒杯中,加入100ml0.1N H2SO4,打成勻漿,煮沸30分鐘,稱取一定的樣品經(jīng)高壓鍋121℃、20分鐘高壓酸解
② 水解
在酸解的樣品中冷卻后加入含有10%糖化酶的10ml2.5MNaAC溶液,搖勻,用15%NaOH調(diào)PH=4.5,用淀粉酶使淀粉水解,也可用磷酸酶使淀粉水解,于50℃恒溫箱中12小時
③ 純化
采用柱層析提純
吸附劑采用的是人造浮石。人造浮石用25%KCl溶液分數(shù)次洗滌,主要是把VB1吸附上去,吸附上去后,再用熱水淋洗,最后用25%KCl-HAC把VB1洗脫下來,這樣就得到純VB1,再根據(jù)上面的原理在堿性下分析。
④ 分析
裝填柱子(離子交換柱)→ 提純 → 氧化 → 測定