淫羊藿為小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim、箭葉淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb. Et Zucc.) Maxim、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim、巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying或朝鮮淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥地上部分。2005版《中國(guó)藥典》一部收載的含量測(cè)定方法，一要是采用紫外分光度法測(cè)定總黃酮的含量，二是采用高效液相色譜法測(cè)定其淫羊藿苷的含量。有關(guān)淫羊藿及其制劑中淫羊藿苷的含量測(cè)定方法主要有高效液相色譜法、薄層掃描法等。

    一、高效液相色譜法

    2005版《中國(guó)藥典》淫羊藿含量測(cè)定項(xiàng)下：

    色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（30：70）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為207nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不得低于1500。

    供試品溶液的制備：取本品葉片粉末約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20m，稱定重量，超聲處理1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

    文獻(xiàn)報(bào)道的HPLC法主要的流動(dòng)相系統(tǒng)有：

    A：乙腈-水

    ①　Waters 515 高效液相色譜儀(Waters 公司)；Metachem Kromasil C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(26：74)；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm；柱溫35℃。

    ②Angilen 1100 液相色譜儀；色譜柱Nova-pak250mm×4.6mm, 10μm)C18柱；乙腈-水(26：74)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。

    ③HP1100型高效液相色譜儀(美國(guó))；色譜柱為C18柱(4.6mm×250mm),大連依利特科學(xué)儀器有限公司提供；流動(dòng)相：乙腈-水(30：70)；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm；柱溫室溫。

    ④島津LC-2010高效液相色譜儀；C18反相柱(150mm×4.6mm,島津公司)；柱溫40℃；流動(dòng)相：乙腈-水(25：75)；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm。

    ⑤Agilent 1100 series 高效液相色譜儀；ApolloC18 ( 250×4.6mm,5μm)；流動(dòng)相：乙腈-水(26：74)；柱溫室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm。

    B：乙腈-磷酸溶液：

    ①Waters 高效液相色譜儀；YWG-C18柱(4.6mm×150mm,10μm ,北京分析儀器廠)；流動(dòng)相乙腈-0.05%磷酸溶液(33：67)；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm；柱溫室溫。

    ②美國(guó)SSI PC2002 高效液相色譜儀；色譜柱Diamonsil C18 (4.6×250mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈-水(用磷酸調(diào)pH值至3.0)(30：70)；柱溫35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm。

    ③SP-1000高效液相色譜儀；色譜柱ODS-C18 (4.6mm×200mm, 5μm)；流動(dòng)相0.075mol/L磷酸溶液-乙腈(用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值為6.6)(74：26)；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm；柱溫37℃。

    C：甲醇-醋酸溶液：

    ①日本島津SPD210A 高效液相色譜儀；ODS柱,10μm,250mm×4mm。流動(dòng)相：甲醇-水-冰乙酸(60：40：0.5)；柱溫30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)270nm。

    ②P200 Ⅱ型高效液相色譜儀；色譜柱為Hypersil ODS2 (250mm×4.6mm,5μm,大連依利特科學(xué)儀器有限公司)；流動(dòng)相為乙腈-0.4%醋酸水溶液(25：75)；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm；柱溫為室溫。

    樣品溶液一般以甲醇、稀乙醇為提取溶劑，凈化處理一般用聚酰胺柱或C18小柱處理；也有用正丁醇-碳酸氫鈉、乙醚-醋酸乙酯等試劑萃取。

    另外，韓海建立復(fù)方骨寶片中有效成分淫羊藿苷含量的高效液相色譜測(cè)定法。采用Shimazdu 高效液相色譜儀；色譜柱Shimpack ODS (4.6mm×250mm, 5Lm)；流動(dòng)相為乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鈉溶液(32：68)；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；柱溫30℃。

    二、薄層掃描法

    以薄層掃描法測(cè)定淫羊藿苷含量時(shí)，常用的薄層展開(kāi)劑為醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水系統(tǒng)。如：胡潤(rùn)淮等建立薄層掃描法測(cè)定復(fù)方仙靈脾注射液中淫羊藿苷含量的方法。采用CS-9301 型雙波長(zhǎng)薄層掃描儀(島津)。薄層層析條件：硅膠GF254板；展開(kāi)劑：醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶1∶1∶1)。薄層掃描條件：采用反射法單波長(zhǎng)鋸齒掃描法，狹縫為1.2mm×1.2mm，線性參數(shù)SX =7，掃描寬度為14mm，測(cè)定波長(zhǎng)為λs=272nm。供試品溶液的制備：用移液管吸取復(fù)方仙靈脾注射液5ml，置分液漏斗中，先用0.1mol/LNaOH飽和過(guò)的正丁醇萃取3次(10,15,20ml)，棄去堿液，合并正丁醇層，再用正丁醇飽和過(guò)的0.1mol/LNaOH溶液洗滌3 次(15,20,20ml)，棄去堿液，合并正丁醇層,置水浴上蒸干，殘?jiān)�以�?ml 溶解，置于已處理好的大孔吸附樹(shù)脂層析柱(1cm ×10cm) 上，依次用蒸餾水、20%乙醇、70%乙醇進(jìn)行洗脫,洗脫液體積均為100ml ，流速為5ml/min。收集70%乙醇洗脫液，回收乙醇后，置于浴上蒸干，殘?jiān)�用少量甲醇溶解，移�?ml 容量瓶中，用甲醇定容至刻度。

    三、其它

    楊廣德等建立了薄層色譜-熒光分光光度法測(cè)定淫羊藿藥材中淫羊藿苷的含量。采用RF-540 型熒光分光光度計(jì)(日本島津)；硅膠G硅膠G加0.1mol/L Na2HPO4的羧甲基纖維素鈉溶液自制板；以醋酸丁酯-甲酸-水(1.3：1：1)在10℃以下放置后的上層溶液作為展開(kāi)劑；顯色劑：10% AlCl3甲醇溶液；在Ex=430nm，Em =480nm條件下測(cè)定熒光強(qiáng)度。藥材用70%乙醇水浴回流提取。

    張明昶等采用一階導(dǎo)數(shù)光譜法測(cè)定骨松寶顆粒中淫藿苷類化合物的含量。采用UV-250IPC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本島津)。樣品供試液制備方法：骨松寶顆粒→除去包裝→加入70%乙醇，60℃水浴中加熱提取→用60℃水超聲振蕩提取→靜置過(guò)夜→用70%乙醇補(bǔ)足重量→上取聚酰胺柱→先用30ml蒸餾水洗脫,棄去洗脫液→再用70%乙醇洗脫，收集乙醇液，定容于50ml 的容量瓶中，即為樣品供試液。在200～400nm范圍內(nèi)自動(dòng)掃描(△λ= 2nm)，以一階導(dǎo)數(shù)峰～谷法(262～276nm) 的振幅值(D)為定量依據(jù)測(cè)定含量。