世界衛(wèi)生組織2003年第二版《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》和衛(wèi)生部2002年發(fā)布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS233-2002《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》對(duì)于臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)工作的開展有積極的借鑒作用.在學(xué)習(xí)有關(guān)文件和標(biāo)準(zhǔn)、建立臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)體系之前,我們首先應(yīng)該清醒地認(rèn)識(shí)到醫(yī)院內(nèi)的臨床實(shí)驗(yàn)室與疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、科研機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室有所不同,因?yàn)榕R床實(shí)驗(yàn)室或檢驗(yàn)科面對(duì)的是就診者未知疾病的標(biāo)本,無法判斷標(biāo)本中所帶的致病微生物.根據(jù)世界衛(wèi)生組織《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》和衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》,依據(jù)病原微生物的傳染性,實(shí)驗(yàn)室感染的機(jī)會(huì),感染后對(duì)人或動(dòng)物的危害程度,以及是否有有效的預(yù)防和治療措施等因素,病原微生物被分為四類,第一類病原微生物是指在通常情況下不可能引起人或動(dòng)物疾病的微生物;第二類病原微生物是指能夠引起人或動(dòng)物疾病,在正常情況下對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、動(dòng)物或者環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害,發(fā)生實(shí)驗(yàn)室暴露可能引起嚴(yán)重感染,但有有效的預(yù)防和治療措施的微生物;第三類病原微生物是指能夠引起嚴(yán)重的人或動(dòng)物疾病,在個(gè)體之間的偶然接觸不會(huì)造成病原傳播,但有有效的預(yù)防和治療措施的微生物;第四類病原微生物是指能夠引起嚴(yán)重的人或動(dòng)物疾病,而且容易在個(gè)體間發(fā)生直接或者間接傳播,通常沒有有效的預(yù)防和治療措施的微生物.從生物安全防護(hù)的角度實(shí)驗(yàn)室共分為四級(jí).一級(jí)實(shí)驗(yàn)室為實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人已知無致病作用的微生物,如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等.二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室為實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物.三級(jí)實(shí)驗(yàn)室為實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有預(yù)防傳染的疫苗.四級(jí)實(shí)驗(yàn)室為實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人體具有高度的危險(xiǎn)性,通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素.與上述情況類似的不明微生物,也必須在四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行.待有充分?jǐn)?shù)據(jù)后再?zèng)Q定此種微生物或毒素應(yīng)在四級(jí)還是較低級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室中處理.

    據(jù)以上定義,醫(yī)院內(nèi)的臨床實(shí)驗(yàn)室或檢驗(yàn)科因接觸可能含有致病微生物的標(biāo)本,應(yīng)達(dá)到二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室要求,二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室適合于對(duì)人和環(huán)境有中度潛在危險(xiǎn)的病源,它與一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的區(qū)別在于:1、實(shí)驗(yàn)人員是否接受過生物安全防護(hù)的培訓(xùn);2、是否有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的限制措施;3、對(duì)已受到或可能受到污染銳器的使用是否足夠重視;4、某些可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠或飛濺物的實(shí)驗(yàn)過程,是否在生物安全柜中或其它物理抑制設(shè)備中進(jìn)行.

    二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建造、實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備與個(gè)體防護(hù)、實(shí)驗(yàn)室制度建設(shè)和操作要點(diǎn)三方面的內(nèi)容:

 

一、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建造

    根據(jù)WHO和我國衛(wèi)生部已發(fā)布實(shí)施的《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》,實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建造時(shí)應(yīng)注意以下內(nèi)容:

1. 實(shí)驗(yàn)室門宜帶鎖、可自動(dòng)關(guān)閉;

2. 每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)設(shè)置洗手池,宜設(shè)置在靠近出口處;

3. 實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應(yīng)易于清潔,不適宜用地毯.地面應(yīng)防滑、無縫隙;

4. 實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)能防水,耐酸堿、耐有機(jī)溶劑、耐熱,耐用于消毒的相關(guān)化學(xué)物質(zhì);

5. 實(shí)驗(yàn)室中的家具應(yīng)牢固.各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙,以易于清潔.實(shí)驗(yàn)室使用的椅子及其它器具,應(yīng)覆蓋易于清洗的非織物;

6. 應(yīng)設(shè)置實(shí)施各種消毒方法的設(shè)施,如高壓滅菌鍋、化學(xué)消毒裝置等對(duì)廢棄物進(jìn)行處理;

7. 應(yīng)有專門放置生物廢棄物的容器.

8. 應(yīng)設(shè)置洗眼裝置.

9. 實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有發(fā)光指示標(biāo)志.

10. 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有可開啟的窗戶,應(yīng)設(shè)置紗窗.

11. 實(shí)驗(yàn)室宜有不少于每小時(shí)3～4次的通風(fēng)換氣次數(shù).

12. 安裝生物安全柜時(shí),要考慮到房間的通風(fēng)和排風(fēng),不會(huì)導(dǎo)致生物安全柜超出正常參數(shù)運(yùn)行.生物安全柜應(yīng)遠(yuǎn)離門、遠(yuǎn)離能打開的窗,遠(yuǎn)離行走區(qū),遠(yuǎn)離其他可能引起風(fēng)壓混亂的設(shè)備,保證生物安全柜氣流參數(shù)在有效范圍內(nèi). 

 

二、實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備及個(gè)體防護(hù)

1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備必要的生物安全柜或其它物理遏制裝置并正確使用,以二級(jí)以上(含二級(jí))生物安全柜為宜.

2、當(dāng)必須在生物安全柜外處理微生物時(shí),需采取面部保護(hù)措施如眼鏡、口罩、面罩或其它防濺裝置.

3、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作必須使用專用的防護(hù)性外衣或制服.人員到非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域如咖啡屋、圖書館、門房時(shí),防護(hù)服必須留在實(shí)驗(yàn)室.防護(hù)服可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中.

4、可能接觸潛在傳染源、被污染的實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面或設(shè)備時(shí),需戴手套.當(dāng)檢測工作結(jié)束時(shí)或手套破損時(shí),應(yīng)摘除手套.一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用.戴手套不能接觸"潔凈"設(shè)施表面如鍵盤、電話等,也不宜到實(shí)驗(yàn)室外.脫掉手套后,要洗手.

5、可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作包括離心、劇烈震蕩或混勻、開啟裝有傳染源的容器容器內(nèi)部的壓力可能與大氣壓不一致均應(yīng)在生物安全柜或其他物理抑制設(shè)備中進(jìn)行,并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備.若選用真空采血管或帶安全罩的離心杯,則離心可在開放實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行,而采血管或離心杯須在生物安全柜中打開或在離心機(jī)中靜置30分鐘后打開.

 

三、實(shí)驗(yàn)室安全制度建設(shè)和操作要點(diǎn)

    安全制度的建設(shè)對(duì)于臨床實(shí)驗(yàn)室而言是生物安全防護(hù)的核心,因?yàn)槎鄶?shù)實(shí)驗(yàn)室的建筑格局已經(jīng)形成,實(shí)驗(yàn)室很難改變,實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備如生物安全柜和工作人員的防護(hù)用具只要有足夠的經(jīng)費(fèi)支持也比較容易獲得,目前最大的問題是實(shí)驗(yàn)人員的安全觀念及軟件建設(shè).二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的操作要點(diǎn)如下:

1.實(shí)驗(yàn)室人口須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志,注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室的特殊要求及離開實(shí)驗(yàn)室的程序.

2.禁止非工作人員進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室.參觀實(shí)驗(yàn)室等特殊情況須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后方可進(jìn)入.

3.禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲(chǔ)存食物.

4.接觸微生物或含有微生物的物品后,脫掉手套后和離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手.

5.以移液器吸取液體,禁止口吸.

6.制定尖銳器具的安全操作規(guī)程.

7.按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程操作,降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生.

8.每天至少消毒一次工作臺(tái)面,活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒.

9.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須進(jìn)行滅活,如高壓滅活.需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲(chǔ)存、運(yùn)輸及消毒滅菌.

10.如有條件工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種 如卡介苗等;

11.必要時(shí)收集從事危險(xiǎn)性工作人員的基本血清留底,并根據(jù)需要定期收集血清樣本,應(yīng)有檢測報(bào)告,如有問題及時(shí)處理;

12.將生物安全程序納入標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范或生物安全手冊(cè),由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人專門保管,工作人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作.

13.工作人員要接受有關(guān)的潛在危險(xiǎn)知識(shí)的培訓(xùn),掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序.

14.實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前必須進(jìn)行消毒.

15.人員暴露于病毒時(shí),及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)并記錄. 

制定生物安全手冊(cè),將以上要點(diǎn)歸納至實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理、尖銳器具安全使用、實(shí)驗(yàn)室消毒防護(hù)、標(biāo)本采集運(yùn)輸、廢棄物處理、工作人員防護(hù)、差錯(cuò)事故處理等規(guī)章制度中.

    需要重申的是對(duì)于目前幾乎沒有任何防護(hù)措施的醫(yī)院檢驗(yàn)科,認(rèn)真學(xué)習(xí)國務(wù)院即將頒布的《致病微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理?xiàng)l例》、世界衛(wèi)生組織《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》和衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》,制定切實(shí)符合醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室或檢驗(yàn)科實(shí)際情況的安全防護(hù)措施是非常必要的.我們應(yīng)以科學(xué)的態(tài)度對(duì)待實(shí)驗(yàn)室的生物安全問題.首先實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別進(jìn)行評(píng)估,保證提供必要的生物安全防護(hù)措施,尤其對(duì)檢驗(yàn)科內(nèi)風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別較高的、接觸高危標(biāo)本幾率較大的區(qū)域如微生物和分子生物學(xué)室予以高度重視,切實(shí)保護(hù)好實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境的安全,盡最大努力減少實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境被感染的可能.