色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透性，延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了雜質(zhì)，造成流體阻力加大所致。淺析其原因，大致有以下幾方面：

 

1、流動相的前處理

 

雜質(zhì)堵塞色譜柱進口濾片，導(dǎo)致壓力升高。這往往是由于流動相沒有過濾，或雖已過濾但過濾不徹底，使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所造成的。

 

2、樣品的沉淀

 

當溶解樣品的溶劑與流動相不一致時，樣品進入色譜柱，有時可能因溶解度降低而沉淀出來，造成壓力升高。

 

3、晶體的析出

 

使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中，它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出，造成流體阻力加大、壓力升高。

 

4、細菌或霉菌孳生

 

霉菌在流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長堵塞濾板，導(dǎo)致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。

 

5、溶質(zhì)吸附

 

當溶質(zhì)在柱子上有較強的吸附，且所用的流動相難以將它們洗脫時，累積的未洗脫溶質(zhì)也會造成阻力增大和壓力升高。7、壓力脈沖

 

運行過程中，有時會產(chǎn)生系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化，填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大，造成壓力升高。

 

6、流動相更換過度較快

 

當改變流動相體系時，不徹底的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中，也會造成壓力升高。