首先，如果要是想在色譜中使用柱前衍生化，其衍生化反應應該滿足以下幾個條件：

1、反應能迅速、定量的進行，反應重復性好，反應條件不苛刻，容易操作；

2、反應的選擇性高，最好只與目標化合物反應，即反應具有專一性；

3、衍生化反應產(chǎn)物只有一種，反應的副產(chǎn)物和過量衍生化試劑不干擾目標化合物的分離與檢測；

4、衍生化試劑方便易得，通用性好。

（1）甲醇法：有機酸與甲醇在催化劑條件下加熱，發(fā)生酯化反應，生成有機酸甲酯。一般采用三氟化硼作催化劑，通常將三氟化硼通入甲醇配制酯化劑，因為配置過程中以放熱，有一定的危險性，現(xiàn)在也有商品化的三氟化硼甲醇溶液可直接購買使用。

（2）重氮甲烷法：重氮甲烷可以與有機酸反應生成有機酸甲酯放出氮氣。此法簡便有效，反應速度快，轉化率高，較少副反應，不引入雜質，但是反應要在非水介質中進行。雖然反應條件溫和，但是重氮甲烷不穩(wěn)定，有爆炸性、有毒，制備與使用時要特別小心。另外，酚羥基在常溫下可以與重氮甲烷反應，但在0℃下可以避免酚羥基反應。

（3）三氟乙酸酐法： 在三氟乙酸酐的存在下有機酸和酸可以反應生成酯，比較適合空間位阻較大的有機酸和醇或酚的酯化。

（4）其他酯化法：有時為了提高方法的靈敏度和選擇性，需要制備甲酯之外的酯，方法與甲酯化方法類似，可以用重氮乙烷、重氮丙烷、重氮甲苯代替重氮甲烷以制得相應的酯，且這些實際的穩(wěn)定性好、爆炸性小。用三氟化硼的丙醇、丁醇或戊醇溶液與有機酸反應也可以制得相應的丙酯、丁酯或戊酯。

酰化能降低羥基、氨基、巰基的極性，改善這些化合物的色譜性能，并提高這些化合物的揮發(fā)性，增加某些易氧化化合物的穩(wěn)定性。當�；瘯r引入含有鹵離子的�；鶗r，還可以提高使用ECD檢測器的靈敏度。常用的酰化試劑有酰鹵、酸酐和反應活性的酰化物。

（1）乙酰化法：標準乙�；�法是將樣品溶于氯仿中，與乙酸酐和乙酸在50℃反應2-6h，真空出去剩余試劑。還可以乙酸鈉為堿性催化劑，以乙酸酐為乙酰化試劑進行乙�；�反應，用于糖類分析。吡啶、三甲胺、甲基咪唑也可以作為堿性催化劑。乙酰化反應通常在非水介質中進行，但是胺類和酚類化合物乙�；瘯r可在水溶液中進行。

（2）多氟�；�法：常用的多氟化試劑是三氟乙酰（TFA）、五氟丙酰（PFP）和七氟丁酰（HFB），其活性是TFA>PFP>HFB。TFA和PFP的衍生物揮發(fā)性較強，而HFB的衍生物ECD靈敏度較高。多氟�；�反應時間除了取決于多氟酰化試劑的活性，還取決于目標化合物的活性。多數(shù)情況下氟�；�反應不需溶劑，但有些情況下也是需要溶劑的，此外有時還需要加堿性催化劑。

在目標化合物中引入鹵原子后可使用ECD檢測器，提高檢測的靈敏度，同時可以改善揮發(fā)性和穩(wěn)定性，常用的鹵化衍生化方法如下：

（1）鹵素法：用鹵素直接作為衍生化試劑處理樣品，鹵素的作用是加成或取代。

（2）鹵化氫法：常用HCl和HBr為衍生化試劑與不飽和鏈發(fā)生加成反應或與羥基發(fā)生置換反應。