確定可能的殘留溶劑：


殘留溶劑的檢測(cè)首先要明確有可能會(huì)有哪些溶劑殘留，也就是溶劑有可能在哪個(gè)環(huán)節(jié)帶入，從原料、制備工藝、處方各個(gè)方面都需要考慮可能的殘留溶劑，再根據(jù)殘留溶劑的類型確定殘留溶劑的殘留量限值。


氣相分析方法注意事項(xiàng)


對(duì)于溶劑殘留檢測(cè)通常用氣相色譜來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，在某些情況也會(huì)用到高效液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用等，而殘留溶劑的氣相色譜檢測(cè)方法的開發(fā)相對(duì)簡(jiǎn)單，適用范圍廣，實(shí)際運(yùn)用中不同的溶劑需要再調(diào)整，小編根據(jù)實(shí)際的氣相色譜使用經(jīng)驗(yàn)需要注意的點(diǎn)進(jìn)行總結(jié)：


1、進(jìn)樣方式


推薦使用的是頂空進(jìn)樣和溶液進(jìn)樣，溶液進(jìn)樣有很大的溶劑峰，氣相色譜一般都使用低沸點(diǎn)的溶劑，這樣會(huì)對(duì)低沸點(diǎn)的溶劑殘留檢測(cè)造成很大的干擾，所以一般溶液進(jìn)樣用于高沸點(diǎn)的溶劑檢測(cè)，頂空進(jìn)樣用于低沸點(diǎn)的溶劑檢測(cè)。


頂空進(jìn)樣時(shí)，通常用水作溶劑，水溶液中溶劑容易揮發(fā)到頂空氣體中，增加檢測(cè)靈敏度；對(duì)于一些極性組分，可以利用鹽析作用來(lái)增加揮發(fā)性；如果非水溶性藥品，可使用N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜等為溶劑。簡(jiǎn)而言之就是頂空進(jìn)樣中，應(yīng)盡量讓有機(jī)溶劑從樣品中揮發(fā)出來(lái)，才能使檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度增加。

頂空溫度的選擇的原則是必須讓待測(cè)組分都能從樣品中揮發(fā)到頂空中，兼顧樣品中物質(zhì)的熱穩(wěn)定性，以免帶入干擾物質(zhì)。平衡時(shí)間也是和溫度相對(duì)應(yīng)的，溫度越高，平衡時(shí)間越短；一般情況使用藥典建議的就可以。

2、色譜柱的選擇

頂空進(jìn)樣一般選用毛細(xì)管色譜柱，溶液進(jìn)樣選擇合適的分流比也可以選擇毛細(xì)管色譜柱，毛細(xì)管柱分離效率高，氣相色譜柱固定液的選擇根據(jù)“相似相溶”的原理，以待分析的化合物的極性選擇合適的色譜柱，相同極性的色譜柱之間可替換。

氣相色譜柱柱子根據(jù)實(shí)際需要，柱子越長(zhǎng)越長(zhǎng)分離效率越高，但時(shí)間長(zhǎng)，柱子內(nèi)徑增大，會(huì)使柱效下降。

3、載氣

載氣的選擇一般是根據(jù)檢測(cè)器和分離要求決定的，氣相色譜一般使用N2作為載氣，氣質(zhì)聯(lián)用時(shí)使用He作為載氣，對(duì)于分離要求高的會(huì)使用H2作為載氣，但H2作載氣的時(shí)候用于ECD檢測(cè)器。

4、進(jìn)樣口溫度

進(jìn)樣口的溫度是根據(jù)樣品的沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性、進(jìn)樣量、柱溫等綜合考慮，不一定要達(dá)到沸點(diǎn)，但要保證樣品能隨著載氣進(jìn)入色譜柱而不析出來(lái)，進(jìn)樣量小的時(shí)候可以降低進(jìn)樣口溫度，一般高于柱溫10~50℃。

5、升溫程序

升溫程序類似于液相色譜的洗脫程序，起始溫度和升溫速率對(duì)分離的影響比較大，起始溫度低有助于提高分離，升溫速率低也是，但過(guò)低峰形變寬，所以需要綜合考慮。相對(duì)液相洗脫程序要容易得多。但終止溫度需要保證樣品都能夠隨著載氣流出，以免影響下一針的干擾。

6、檢測(cè)器


定量常用的檢測(cè)器是FID，TCD也是通用型的檢測(cè)器，但靈敏度相對(duì)較低。FPD和NPD適合含硫和含氮溶劑的檢測(cè)，含鹵素的溶劑，適合用ECD檢測(cè)。

7、標(biāo)準(zhǔn)溶液和基體植物油的選擇

實(shí)際檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，不同廠家生產(chǎn)的6號(hào)溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液組分有一定的差別，有些會(huì)殘留少量干擾溶劑，檢測(cè)過(guò)程與6號(hào)溶劑同時(shí)揮發(fā)溢出，進(jìn)而影響殘留溶劑的檢測(cè)結(jié)果，有些甚至差異較大。因此，不僅要選擇正規(guī)廠家購(gòu)買標(biāo)準(zhǔn)溶液，同時(shí)也可以對(duì)標(biāo)液進(jìn)行預(yù)檢測(cè)，此外每批6號(hào)溶劑標(biāo)液都要重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

國(guó)標(biāo)中推薦采用精制植物油或超聲脫氣后的植物油作為基體植物油，其目的是選擇不含有殘留溶劑的植物油，統(tǒng)一樣品與標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備條件，同時(shí)消除基質(zhì)效應(yīng)。實(shí)際操作過(guò)程中可以選擇壓榨植物油，也可以對(duì)浸出植物油油進(jìn)行低溫烘烤來(lái)讓殘留溶劑揮發(fā)。實(shí)驗(yàn)前可以取部分進(jìn)行儀器檢驗(yàn)，確�；�體植物油中的溶劑殘留已揮發(fā)干凈。

8、平衡時(shí)間和溫度

平衡時(shí)間和溫度會(huì)影響氣液兩相的動(dòng)態(tài)平衡，對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性影響很大。平衡時(shí)間不夠，6號(hào)溶劑無(wú)法完全從液相逸入液面空間的氣相中，但平衡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致油脂基質(zhì)分解，一般以10min為宜。提高平衡溫度有利于增加6號(hào)溶劑的響應(yīng)，提高檢測(cè)靈敏度。但過(guò)高的平衡溫度會(huì)導(dǎo)致取樣時(shí)溶劑的冷凝，降低進(jìn)樣精度，所以一般選擇50~60℃。雖然氣液兩相比例對(duì)平衡的影響不顯著，但考慮到降低系統(tǒng)誤差，稱樣量要盡量一致，一定要準(zhǔn)確在5.00g。

9、樣品提取方式

傳統(tǒng)的提取方式采用頂空瓶直接稱樣，加入提取溶劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液后密封，在頂空裝置中振蕩或水浴中加熱，供色譜進(jìn)樣分析。但目前有研究發(fā)現(xiàn)通過(guò)塑料離心管來(lái)代替頂空瓶，并增加離心操作，回收率為91.0%~106.5%，高于頂空瓶稱樣法國(guó)。原因是樣品溶解更充分，而且上方氣壓更有利于提高回收率。無(wú)論采用哪種容器，都要確保其氣密性，確保不漏氣。


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