HPLC:
又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”等,液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。
UPLC:
色譜理論認(rèn)為提高色譜柱的效能(efficiency)就能增加儀器的解析度(resolution),而運用粒徑低于2μm的小顆粒無疑是增加效能的好方法。但減小固定相的粒度以增加色譜柱效能一直的色譜儀器科學(xué)的瓶頸,因為小顆粒不僅要求系統(tǒng)能承受高于目前極限壓力(比如9000psi),需要更小的系統(tǒng)體積(死體積),并且需要能適應(yīng)可能只有幾秒峰寬的高速檢測器。UPLC具有超低擴散體積(小于15μL)可盡可能發(fā)揮亞2μm色譜柱性能。色譜工作者使用UPLC結(jié)合小顆粒色譜柱可以獲得更好的分離度,靈敏度,更快的分析速度。
UHPLC:
UHPLC的誕生是UPLC 對色譜分離技術(shù)帶來的一系列變化之一。UHPLC在制造技術(shù),擴散體積和耐受壓力方面進行了優(yōu)化,使之能夠匹配2.5~3.5μm顆粒度的柱子,大限度發(fā)揮色譜性能。采用顆粒更小的固相不僅可以實現(xiàn)更高的分辨率,同時還能縮短整體分析時間。
那么區(qū)分HPLC、UHPLC、UPLC的關(guān)鍵點就是分離性能。