手機(jī)版
是不是想想自己能在里面工作就hin激動(dòng)呢？
欣賞完實(shí)驗(yàn)室，下面就要開(kāi)始上手了。
咱們第一次先從最基礎(chǔ)的來(lái)，
實(shí)驗(yàn)室滅菌方法詳解
首先要明確滅菌的重要性，往輕了說(shuō)，我們進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室會(huì)接觸到很多分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。會(huì)有一些像細(xì)胞間一樣要求完全無(wú)菌的環(huán)境，一旦有微生物存在，我們的幾個(gè)星期甚至幾個(gè)月的心血便都會(huì)付之東流。往重了說(shuō)，一些動(dòng)物解剖檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可能攜帶高致病菌，對(duì)人體會(huì)有極大危害，所以實(shí)驗(yàn)室第一步滅菌，萬(wàn)萬(wàn)要認(rèn)真。
高溫滅菌法
提到高溫滅菌，相信大家日常生活中都應(yīng)該用過(guò)祖?zhèn)鞯娜f(wàn)能100度法，買個(gè)新的餐具啦，水杯啦，都會(huì)習(xí)慣性的拿開(kāi)水燙一燙，意在消毒，這的確也是有一定科學(xué)依據(jù)的。高溫使微生物的蛋白質(zhì)及酶發(fā)生凝固或變性而死亡，是應(yīng)用最廣泛且有效的滅菌方法。下面我們說(shuō)兩種方法。
用高溫加高壓滅菌，不僅可殺死一般的細(xì)菌，對(duì)細(xì)菌芽胞也有殺滅效果，是最可靠、應(yīng)用最普遍的滅菌法。
生活中，我們可能是這樣
當(dāng)然實(shí)驗(yàn)室里，我們肯定更專業(yè)
圖為實(shí)驗(yàn)室常用的高壓滅菌鍋
一大波專業(yè)名詞來(lái)襲↓↓
高壓蒸氣滅菌器的類型和樣式較多，如：①下排氣式壓力蒸氣滅菌器是普遍應(yīng)用的滅菌設(shè)備，壓力升至102.9kPa，溫度達(dá)121～126℃，維持20～30分鐘，可達(dá)到滅菌目的。②脈動(dòng)真空壓力蒸氣滅菌器已成為目前最先進(jìn)的滅菌設(shè)備。滅菌條件要求：蒸氣壓力205.8kPa，溫度達(dá)132℃以上并維持10分鐘，即可殺死包括具有頑強(qiáng)抵抗力的細(xì)菌芽胞在內(nèi)的一切微生物。
注
意
事
項(xiàng)
包裹的物品不宜太大，一般應(yīng)小于30cm×30cm×50cm，大于該尺寸需要酌情延長(zhǎng)滅菌時(shí)間；
1.高壓鍋內(nèi)的包裹不要排得太密，以免妨礙蒸氣透入，影響滅菌效果；
2.對(duì)塑料制品不宜放置過(guò)于擁擠，以免發(fā)生形變；
3.壓力、溫度和時(shí)間達(dá)到要求時(shí)，指示帶上和化學(xué)指示劑即應(yīng)出現(xiàn)已滅菌的色澤或狀態(tài)；
4.銳性器械，如刀、剪不宜用此法滅菌，以免變鈍；
5.瓶裝液體滅菌時(shí)，如有塑料瓶蓋要適當(dāng)旋松瓶蓋，并用牛皮紙或紗布包扎瓶口；如有橡皮塞時(shí)，應(yīng)插入針頭排氣，切記要保持瓶?jī)?nèi)外的連通，防止高溫膨脹爆裂；
6.注明滅菌日期和物品保存時(shí)限，一般可保留1～2周；
7.應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，每次滅菌前，應(yīng)檢查安全閥的性能，以防壓力過(guò)高發(fā)生爆炸，保證安全使用。
干熱適用于易被濕熱損壞和在干燥條件下使用更方便的物品（如金屬、玻璃、陶瓷及凡士林紗布條等）滅菌。由于其對(duì)烤箱要嚴(yán)格要求（國(guó)內(nèi)產(chǎn)的烘箱質(zhì)量都有點(diǎn)懸），且大功率、高溫下危險(xiǎn)系數(shù)較大，一般不建議使用！
當(dāng)然我們不是這么像軍訓(xùn)時(shí)的太陽(yáng)
那樣干熱
而是，當(dāng)當(dāng)當(dāng)當(dāng)~
滅菌條件為：160℃維持2小時(shí)；170℃維持1小時(shí)；180℃維持30分鐘；特殊情況下，如需要滅活器械、容器中對(duì)于溫度超級(jí)穩(wěn)定的RNase時(shí)，才考慮使用（其實(shí)也可以DEPC預(yù)處理器械、容器、溶劑等，然后濕熱滅菌�。�
注意
1.對(duì)滅菌對(duì)象的理化性質(zhì)有一定了解，明確對(duì)象在高溫下的穩(wěn)定性；
2.對(duì)設(shè)備的情況、參數(shù)有清醒認(rèn)識(shí)，了解設(shè)備的溫度設(shè)計(jì)上限；
3.專項(xiàng)供電，確保接入電路足夠負(fù)荷；
4.滅菌過(guò)程中，相關(guān)人員要實(shí)時(shí)在崗監(jiān)管，不得離崗，如遇特發(fā)情況及時(shí)切斷電源！
過(guò)濾是物理阻留的方法將細(xì)菌除去，適用的是熱不穩(wěn)定試劑。不要以為是物理法就除不干凈細(xì)菌，我們用的可是孔徑為0.22μm的微濾膜，甚至是孔徑更小的納濾膜(孔徑可達(dá)20 -50nm )。
當(dāng)然，孔徑小，流速自然也就慢一些，所以我們一般用小孔徑濾膜過(guò)濾之前會(huì)使用大孔徑的濾膜進(jìn)行預(yù)過(guò)濾。
在正式過(guò)濾前，必須進(jìn)行過(guò)濾系統(tǒng)的密閉性和濾膜的完整性測(cè)試。過(guò)濾過(guò)程要在等級(jí)A的潔凈室內(nèi)進(jìn)行（通常可在超凈臺(tái)完成）。
紫外線滅菌
從左到右分別是X-射線、紫外光。可見(jiàn)光、紅外光，光的波長(zhǎng)依次遞增。常用的殺菌波長(zhǎng)254納米位于紫外光中遠(yuǎn)紫外線（UVC）波段。
紫外線的定義是波長(zhǎng)在10納米到400納米之間的電磁輻射。不過(guò)在實(shí)際應(yīng)用中，我們一般使用的波長(zhǎng)一般在100納米以上。我們?nèi)粘？吹降囊恍╋埖昀锏耐肟旯窭锘蛘咭恍┦称芳庸さ牡胤接玫淖仙臒艟褪怯玫倪@種方法。
總的來(lái)說(shuō)，紫外線的穿透能力比較差，通常也就能穿透兩三厘米的厚度。但如果用在某些物質(zhì)短時(shí)間滅菌，效果還是很好的。
1.選擇紫外燈時(shí)，應(yīng)該仔細(xì)核對(duì)型號(hào)、適用范圍和注意事項(xiàng)。不要進(jìn)入開(kāi)啟紫外消毒燈的室內(nèi)。千萬(wàn)不要對(duì)著消毒燈驗(yàn)鈔或者觀察熒光，任何時(shí)候都不應(yīng)該直視紫外燈管。紫外燈應(yīng)該盡可能只在封閉空間內(nèi)小范圍使用，并避免不必要的暴露
2.在使用過(guò)程中，應(yīng)保持紫外線燈表面的清潔，一般每?jī)芍苡镁凭耷虿潦靡淮�，發(fā)現(xiàn)燈管表面有灰塵、油污時(shí)，應(yīng)隨時(shí)擦拭
3.用紫外線消毒物品表面時(shí)，應(yīng)使照射表面受到紫外線的直接照射，且應(yīng)達(dá)到足夠的照射劑量
化學(xué)滅菌法
（1）浸泡法 選用殺菌譜廣、腐蝕性弱、水溶性消毒劑，將物品浸沒(méi)于消毒劑內(nèi)，在標(biāo)準(zhǔn)的濃度和時(shí)間內(nèi)，達(dá)到消毒滅菌目的。
（2）擦拭法 選用易溶于水、穿透性強(qiáng)的消毒劑，擦拭物品表面，在標(biāo)準(zhǔn)的濃度和時(shí)間里達(dá)到消毒滅菌目的。
（3）薰蒸法 加熱或加入氧化劑，使消毒劑呈氣體，在標(biāo)準(zhǔn)的濃度和時(shí)間里達(dá)到消毒滅菌目的。
適用于室內(nèi)物品及空氣消毒或精密貴重儀器和不能蒸、煮、浸泡的物品（血壓計(jì)、聽(tīng)診器以及傳染病人用過(guò)的票證等），均可用此法消毒。
（4）噴霧法 借助普通噴霧器或氣溶膠噴霧器，使消毒劑產(chǎn)生微粒氣霧彌散在空間，進(jìn)行空氣和物品表面的消毒。
（5）環(huán)氧乙烷氣體密閉消毒法 將環(huán)氧乙烷氣體置于密閉容器內(nèi)，在標(biāo)準(zhǔn)的濃度、濕度和時(shí)間內(nèi)達(dá)到消毒滅菌目的。
火焰滅菌法
是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡(jiǎn)便，適合于耐火焰材料（如金屬、玻璃及瓷器等）物品與用具的滅菌，不適合藥品的滅菌。
最常見(jiàn)的火焰滅菌，酒精燈。
圖為加熱接種環(huán)
注意
1、酒精燈的燈芯要平整.
2、添加酒精時(shí),不超過(guò)酒精燈容積的2/3；酒精不少于1/4.
3、絕對(duì)禁止向燃著的酒精燈里添加酒精,以免失火.
4、絕對(duì)禁止用酒精燈引燃另一只酒精燈.
5、用完酒精燈,必須用燈帽蓋滅,不可用嘴去吹.
6、不要碰倒酒精燈,萬(wàn)一灑出的酒精在桌上燃燒起來(lái),應(yīng)立即用濕布撲蓋.
以上就是實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法，有了它們，實(shí)驗(yàn)室一切微生物統(tǒng)統(tǒng)不怕。
