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分析方法的專(zhuān)屬性和靈敏度是方法能夠使用的前提，而精密度和準(zhǔn)確度則是研發(fā)人員不斷追求的目標(biāo)。為什么這么說(shuō)呢？接下來(lái)我們就來(lái)簡(jiǎn)單說(shuō)說(shuō)方法的精密度（Precision）和準(zhǔn)確度（Accuracy），看完之后可能你就會(huì)理解我的說(shuō)法了。
首先為什么要把這兩個(gè)放到一起來(lái)說(shuō)？
就像方法驗(yàn)證中的定量限和檢測(cè)限，精密度和準(zhǔn)確度也是緊密相關(guān)的兩個(gè)項(xiàng)目。良好的精密度是方法具有較好準(zhǔn)確度的必要條件，但是良好的準(zhǔn)確度還與其他因素（如基質(zhì)干擾、溶液配制、結(jié)果計(jì)算等）有關(guān)。
接下來(lái)咱們來(lái)看它們具體的定義：
精密度：系指在規(guī)定的測(cè)定條件下，同一份均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差（Deviation）、標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示。
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在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度稱(chēng)為重復(fù)性;
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在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的條件改變，如不同時(shí)間、不同分析人員、不同設(shè)備等測(cè)定結(jié)果之間的精密度，稱(chēng)為中間精密度;
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不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果之間的精密度，稱(chēng)為重現(xiàn)性。
準(zhǔn)確度：準(zhǔn)確度系指用所建立方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參比值接近的程度。一般用回收率（Recovery）表示。
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準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的線(xiàn)性范圍內(nèi)試驗(yàn)。
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準(zhǔn)確度可由所測(cè)定的精密度、線(xiàn)性和專(zhuān)屬性推算出來(lái)。
那為什么說(shuō)精密度和準(zhǔn)確度是研發(fā)人員一個(gè)追求的目標(biāo)呢？
首先：不是所有的方法都需要精密度和準(zhǔn)確度的，比如定性方法。
其次：定義中可以看出來(lái)它們代表的都是一種接近程度。對(duì)于程度的探尋，它是永無(wú)止境的。
最后：我們需要了解方法驗(yàn)證的目的，除了證明方法滿(mǎn)足預(yù)期用途之外，更重要的一點(diǎn)就是確認(rèn)方法誤差的來(lái)源和大小。方法的精密度和準(zhǔn)確度取決于方法開(kāi)發(fā)過(guò)程，因此它是一個(gè)研發(fā)人員追求的目標(biāo)。
既然提到了誤差，接下來(lái)咱們就說(shuō)說(shuō)方法的誤差。
誤差這個(gè)詞相信大家都不陌生了。我們將分析結(jié)果與真實(shí)結(jié)果之間的差值稱(chēng)為誤差。它是方法固有的，無(wú)法避免的。按照類(lèi)型主要分為兩類(lèi)：
一）系統(tǒng)誤差：它是由某種確定的原因引起的，一般有固定的方向（正或負(fù)）和大小，重復(fù)測(cè)定可重復(fù)出現(xiàn)。根據(jù)系統(tǒng)誤差的來(lái)源，又可區(qū)分為方法誤差、儀器誤差、試劑誤差及操作誤差等。
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方法誤差：由于分析方法本身的缺陷或不夠完善所引起的誤差。例如，在滴定分析法中，由于滴定反應(yīng)進(jìn)行不完全，或干擾離子的影響，導(dǎo)致終點(diǎn)判斷不準(zhǔn)確。
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儀器誤差：由于所用儀器本身不夠準(zhǔn)確或未經(jīng)校正所引起的誤差。例如，砝碼、滴定管刻度不夠準(zhǔn)確等。
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試劑誤差：由于試劑不純或含有雜質(zhì)引入的誤差。
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操作誤差：由于操作人員的習(xí)慣而引起的誤差。例如，讀取滴定管的讀數(shù)時(shí)偏高或偏低。
這類(lèi)系統(tǒng)性誤差（Systematic error）實(shí)際影響的是結(jié)果的真實(shí)性（Affect Trueness），即與真實(shí)值的偏離程度。
二）偶然誤差：或稱(chēng)隨機(jī)誤差，它是由不確定的原因引起的，可能由于實(shí)驗(yàn)時(shí)環(huán)境的溫度、濕度和氣壓的微小變化以及其他操作條件的微小波動(dòng)所造成，其方向（正或負(fù)）和大小都不固定。
這類(lèi)隨機(jī)性誤差（Random error）實(shí)際影響的是結(jié)果的精密度（Affect Precision），即數(shù)據(jù)間的離散程度。
因此，我們用一個(gè)等式來(lái)描述那就是：
注：偶然誤差可以通過(guò)增加平行試驗(yàn)來(lái)減小；系統(tǒng)誤差可以通過(guò)空白、對(duì)照和回收試驗(yàn)來(lái)校正。
講到這，相信大家對(duì)準(zhǔn)確度和精密度已經(jīng)有了一個(gè)基本的認(rèn)識(shí)了。準(zhǔn)確度，它是一個(gè)綜合的結(jié)果，它是所有誤差相互作用后的最終體現(xiàn)。而精密度，它是通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)工具呈現(xiàn)出來(lái)的數(shù)據(jù)結(jié)果的偏差大小，主要是反映隨機(jī)誤差的影響。
這里為了便于大家理解，我們將準(zhǔn)確度稱(chēng)為總體準(zhǔn)確度（Overall Accuracy），它的含義是將測(cè)試樣品制備的誤差、基質(zhì)的干擾以及結(jié)果計(jì)算的誤差都考慮進(jìn)去。即
基質(zhì)的干擾指的是測(cè)試溶液中除目標(biāo)物以外的所有成分（對(duì)于有關(guān)物質(zhì)而言，其主成分、溶劑、其他雜質(zhì)都是干擾基質(zhì)），對(duì)目標(biāo)物檢測(cè)產(chǎn)生的干擾（如增強(qiáng)或抑制）。因此，這也是為什么在進(jìn)行準(zhǔn)確度驗(yàn)證的時(shí)候，法規(guī)指南推薦的方法是加標(biāo)回收率，主要目的就是評(píng)估基質(zhì)的干擾。
如下圖所示，若線(xiàn)性溶液和準(zhǔn)確度溶液配制的基質(zhì)不同，往往會(huì)導(dǎo)致實(shí)際的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不同。我們?cè)隍?yàn)證過(guò)程中需要注意不同溶液中的基質(zhì)差異。
精密度和準(zhǔn)確度還受到樣品取樣、稱(chēng)量、定量稀釋等溶液配制過(guò)程中的誤差影響。換句話(huà)說(shuō)，方法的精密度和準(zhǔn)確度不會(huì)好于測(cè)試溶液制備的精密度和準(zhǔn)確度。
舉兩個(gè)例子說(shuō)明下這個(gè)問(wèn)題：
1）我們準(zhǔn)備將儲(chǔ)備液稀釋100倍，實(shí)驗(yàn)室使用的是A級(jí)的移液管和容量瓶，你覺(jué)得以下哪種方式是最準(zhǔn)確的？
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先1.0ml/10ml，再1.0ml/10ml
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先5.0ml/50ml，再5.0ml/50ml
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先10.0ml/100ml，再10.0ml/100ml
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1.0ml/100ml
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2.0ml/200ml
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5.0ml/500ml
要回答這個(gè)問(wèn)題，我們首先得知道A級(jí)移液管和容量瓶對(duì)應(yīng)的允許誤差（參考JJG196-2006），
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儀器規(guī)格
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容量允許誤差
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相對(duì)誤差
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1ml移液管
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0.007ml
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0.7%
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2ml移液管
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0.01ml
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0.5%
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5ml移液管
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0.015ml
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0.3%
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10ml移液管
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0.02ml
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0.2%
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10ml容量瓶
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0.02ml
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0.2%
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50ml容量瓶
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0.05ml
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0.1%
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100ml容量瓶
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0.1ml
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0.1%
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200ml容量瓶
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0.15ml
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0.075%
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500ml容量瓶
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0.25ml
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0.05%
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因此，各步誤差的總和（以最大誤差來(lái)統(tǒng)計(jì)）：
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0.7%+0.2%+0.7%+0.2%=1.8%
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0.3%+0.1%+0.3%+0.1%=0.8%
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0.2%+0.1%+0.2%+0.1%=0.6%
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0.7%+0.1%=0.8%
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0.5%+0.075%=0.575%
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0.3%+0.05%=0.35%
答案：f（從最準(zhǔn)確的角度分析）
2）在滴定分析中，一般滴定管讀數(shù)有±0.01ml 的絕對(duì)誤差，同時(shí)一次滴定需要讀數(shù)兩次，因此可能造成的最大誤差是±0.02ml。為使滴定讀數(shù)的相對(duì)誤差≤0.1％，那么消耗滴定劑的體積就需要≥20ml。
最后，我們?cè)倥e個(gè)例子來(lái)說(shuō)下計(jì)算方法對(duì)于準(zhǔn)確度的影響。
如下圖所示，當(dāng)有關(guān)物質(zhì)方法中雜質(zhì)的相對(duì)響應(yīng)因子（RRF）遠(yuǎn)小于1時(shí)，若我們計(jì)算結(jié)果不進(jìn)行校正，直接采用主峰的線(xiàn)性來(lái)計(jì)算（如面積百分比計(jì)算），那么雜質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果就會(huì)比實(shí)際含量低，導(dǎo)致雜質(zhì)被低估。
關(guān)于計(jì)算方式的選擇，這里我們簡(jiǎn)單地補(bǔ)充兩點(diǎn)：
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對(duì)于是采用面積歸一法還是自身稀釋對(duì)照法，通常是在方法開(kāi)發(fā)階段將供試品稀釋100倍來(lái)看下稀釋后的溶液與原溶液是否成線(xiàn)性。若是，則可以用面積歸一法；若不是，則建議使用自身對(duì)照法。
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對(duì)于是采用單點(diǎn)外標(biāo)還是標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法外標(biāo)，主要是計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的截距。若無(wú)明顯截距（通常為不大于10%），則可以使用單點(diǎn)外標(biāo)；若有明顯截距，則建議使用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法。
此處需要特別說(shuō)明的一點(diǎn)就是：驗(yàn)證過(guò)程中回收率計(jì)算方法應(yīng)與檢驗(yàn)方法一致。也就是說(shuō)，如果檢驗(yàn)方法中規(guī)定的是外標(biāo)法，那么回收率計(jì)算時(shí)應(yīng)采用外標(biāo)法；如果檢驗(yàn)方法中采用的是自身稀釋對(duì)照法，則回收率計(jì)算時(shí)應(yīng)采用自身稀釋對(duì)照法；如果檢驗(yàn)方法規(guī)定的是主成分外標(biāo)法（個(gè)人比較推薦的方法），那么回收率計(jì)算時(shí)就應(yīng)采用主成分外標(biāo)法。否則，一律都按照外標(biāo)法來(lái)計(jì)算回收率是沒(méi)有意義的。
最后，我們?cè)僬f(shuō)下做法和要求（參考中國(guó)藥典9101 分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則）：
1、精密度：
做法：
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在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度（分析方法擬定的樣品測(cè)定濃度，相當(dāng)于100%濃度水平）的供試品，用至少6 份的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià);
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設(shè)計(jì)至少3 種不同濃度，每種濃度分別制備至少3 份供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，用至少9 份樣品的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。
注意的是：采用第二種方法進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，濃度的設(shè)定應(yīng)考慮樣品的濃度范圍。
要求：
精密度的結(jié)果應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或置信區(qū)間。樣品中待測(cè)定成分含量和精密度RSD可接受范圍參考表3。
在基質(zhì)復(fù)雜、組分含量低于0.01%及多成分等分析中，精密度限度可適當(dāng)放寬。對(duì)于這個(gè)指導(dǎo)原則中的可接受標(biāo)準(zhǔn)，本文不做過(guò)多評(píng)論。但建議的是在國(guó)內(nèi)申報(bào)時(shí)，大家還是能做到就盡量去做到。
2、準(zhǔn)確度
做法：
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在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度(相當(dāng)于100%濃度水平)的供試品，用至少6份樣品的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià);
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設(shè)計(jì)至少 3 種不同濃度，每種濃度分別制備至少3份供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，用至少9份樣品的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，且濃度的設(shè)定應(yīng)考慮樣品的濃度范圍。兩種方法的選定應(yīng)考慮分析的目的和樣品的濃度范圍。
同時(shí)，由于準(zhǔn)確度一般用回收率來(lái)表示，我們以原料藥的含量和有關(guān)物質(zhì)為例來(lái)說(shuō)下回收率的做法。
1）含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度---直接回收率
原料藥含量測(cè)定時(shí)，由于目標(biāo)物通常為純物質(zhì)，可以直接用已知純度的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定，直接計(jì)算回收率=測(cè)得值/實(shí)際值，或用所測(cè)定結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。當(dāng)原料藥為多組分時(shí)，也可以使用加標(biāo)回收率來(lái)測(cè)定。
原料藥的含量，線(xiàn)性范圍一般為實(shí)際測(cè)定濃度的 80%~120%，其目的是考慮到這一范圍足夠可以滿(mǎn)足《藥典》中規(guī)定“約” 的定義為 90%~110%的范圍;
2）有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法的準(zhǔn)確度---加標(biāo)回收率
原料藥有關(guān)物質(zhì)測(cè)定時(shí)，主要需考察基質(zhì)或其它物質(zhì)的相互干擾，因此可向原料藥中加入已知量的雜質(zhì)對(duì)照品進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率=（測(cè)得量-樣品中的量）/加入量。如不能得到雜質(zhì)對(duì)照品，可用所建立的方法與另一成熟方法(如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的方法)的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。
有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定，實(shí)際操作的范圍應(yīng)該是定量限(或報(bào)告限)至質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的120%以上，同時(shí)需要進(jìn)行主成分線(xiàn)性范圍的測(cè)定（最高濃度為實(shí)際測(cè)定時(shí)稀釋后的濃度的120%以上，最低濃度為定量限濃度），用于校正因子的測(cè)定。
要求：
對(duì)于化學(xué)藥應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率(%)，或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或置信區(qū)間（置信度一般為95%）; 樣品中待測(cè)定成分含量和回收率限度關(guān)系可參考表2。
同樣的，在基質(zhì)復(fù)雜、組分含量低于0.01%及多成分等分析中，回收率限度可適當(dāng)放寬。
