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馬鈴薯莖尖脫毒及組培快繁技術(shù)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-07-18
核心提示:我國(guó)是馬鈴薯生產(chǎn)第一大國(guó),2008年種植面積達(dá)到573.33萬(wàn)hm2,鮮薯總產(chǎn)達(dá)8 800萬(wàn)t,平均單產(chǎn)約15.45t/hm2,總產(chǎn)位居世界第一。馬鈴薯是無(wú)性繁殖作物,體內(nèi)病毒的積累可使品種種性退化、品質(zhì)和產(chǎn)量降低,對(duì)其生產(chǎn)造成嚴(yán)重危害。
      我國(guó)是馬鈴薯生產(chǎn)第一大國(guó),2008年種植面積達(dá)到573.33萬(wàn)hm2,鮮薯總產(chǎn)達(dá)8 800萬(wàn)t,平均單產(chǎn)約15.45t/hm2,總產(chǎn)位居世界第一。馬鈴薯是無(wú)性繁殖作物,體內(nèi)病毒的積累可使品種種性退化、品質(zhì)和產(chǎn)量降低,對(duì)其生產(chǎn)造成嚴(yán)重危害。因?yàn)榇蟛糠植《静荒芨腥抉R鈴薯莖尖組織,通過(guò)莖尖脫毒,生產(chǎn)脫毒種薯用于生產(chǎn)是防止馬鈴薯退化的切實(shí)可行的措施。馬鈴薯脫毒及組培快繁中所用基質(zhì)和培養(yǎng)條件等關(guān)鍵技術(shù)方面的報(bào)道較多,但對(duì)下寨65和青薯168報(bào)道較少,本文既通過(guò)對(duì)馬鈴薯下寨65和青薯168兩個(gè)品種進(jìn)行脫毒及組培試驗(yàn)研究,為西部高原地區(qū)當(dāng)家品種脫毒種薯的工廠化生產(chǎn)提供幫助。

1 材料和方法

1.1 供試材料

采用當(dāng)家品種下寨65和青薯168.

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 催芽 于11月中旬左右,挑揀表皮光滑、正常薯形、大小均勻、無(wú)病害和無(wú)損傷薯塊,放置在有供暖的房間,室內(nèi)溫度24 ℃左右進(jìn)行催芽。在催芽前薯塊正處于休眠期,采用0.05~0.l0 mg/L的GA3來(lái)處理薯塊,浸沒于GA3溶液中10~20 min,以打破休眠[4].

1.2.2 種薯處理 采用MS培養(yǎng)基,加入不同配比的激素,準(zhǔn)備BA、NAA、GA3、IBA和IAA,由于激素在培養(yǎng)基中用量非常少,且不易溶于水,所以采用特殊的配置方法,配置成500 mg/L的溶液待用。當(dāng)兩個(gè)品種的種薯芽長(zhǎng)到2~3 cm時(shí),挑選生長(zhǎng)健壯的芽,用清水沖洗芽部表面污物,在無(wú)菌操作室采用12種不同的方法進(jìn)行表面消毒,用最近制作的蒸餾水沖洗四五次,將表面消毒劑徹底清除,不同表面消毒劑處理時(shí)間見表1.

1.2.3 莖尖組織培養(yǎng) 在解剖鏡下剝?nèi)〈笮?.30~

0.50 mm莖尖生長(zhǎng)點(diǎn),置于不同濃度生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基編號(hào)為MS1~MS12,另設(shè)不加任何生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基作為對(duì)照(CK),植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比見表2.

1.2.4 馬鈴薯脫毒苗培養(yǎng) 在無(wú)菌條件下,將得到的無(wú)毒苗進(jìn)行切段,每段帶一葉,置于不同種類、濃度的1/2MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),中國(guó)農(nóng)業(yè)網(wǎng)以不加任何生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的1/2MS培養(yǎng)基作為對(duì)照,編號(hào)為M1~M9,快繁培養(yǎng)基配比見表3.

2 結(jié)果與分析

2.1 不同表面消毒方法對(duì)莖尖成活率和污染的影響

從表4可以看出,在莖尖組織培養(yǎng)過(guò)程中,外植體在清水沖洗后,直接采用0.1 %升汞或5 %次氯酸鈉消毒,都可以將污染控制在5 %以下,但需時(shí)稍長(zhǎng),不同程度地影響到成活率。另外由于升汞的滲透性強(qiáng),不宜徹底清洗,且對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重,建議盡量不要使用。

2.2 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑培養(yǎng)基配比對(duì)莖尖組織生長(zhǎng)的影響

從表5可以看出,不含生物調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基,馬鈴薯莖尖組織的生長(zhǎng)非常緩慢,導(dǎo)致成苗率低下。在同等條件下,KT和6-BA對(duì)馬鈴薯莖尖組織的生長(zhǎng)都具有促進(jìn)作用,且效果顯著,就這兩種物質(zhì)而言,含有KT的培養(yǎng)基中成苗率較低。在同等條件下加入GA3,可明顯促進(jìn)馬鈴薯莖尖組織分化,加快生長(zhǎng),提高成苗率。

2.3 不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比對(duì)馬鈴薯脫毒苗快繁的影響

經(jīng)過(guò)觀測(cè)表明,與對(duì)照培養(yǎng)基相比較,培養(yǎng)基中加入生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑后,芽萌發(fā)推遲,有效促進(jìn)幼根生長(zhǎng)。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度過(guò)大時(shí),愈傷組織發(fā)達(dá),生根受到抑制。在實(shí)驗(yàn)中觀察到下寨65對(duì)NAA較為敏感,濃度稍大就會(huì)產(chǎn)生較大愈傷組織,生根較為緩慢,而青薯168反應(yīng)較為遲鈍,結(jié)果見表6.

3 結(jié)論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在馬鈴薯脫毒技術(shù)實(shí)施過(guò)程中,采用酒精與其他兩種表面消毒劑配合使用效果最好,能有效控制污染,降低對(duì)莖尖組織的影響。剝離的莖尖組織誘導(dǎo)成苗是脫毒快繁的關(guān)鍵技術(shù),在實(shí)驗(yàn)中,KT和BA均有助于莖尖組織分化成苗。在快繁中,適當(dāng)濃度的生物調(diào)節(jié)劑對(duì)馬鈴薯莖段生根有促進(jìn)作用,但當(dāng)濃度過(guò)高時(shí)只產(chǎn)生分生組織,不利于小苗生根,而且各品種表現(xiàn)有所不同。

編輯:foodqa

 
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